一、三氧化二砷对NB4细胞珠端粒酶活性的影响（论文文献综述）
赵丽凤[1]（2020）在《三氧化二砷联合双氢青蒿素抗急性单核细胞白血病的实验研究》文中研究表明目的以人急性单核细胞白血病细胞株THP-1细胞和SHI-1细胞为研究对象,考察三氧化二砷联合双氢青蒿素对急性单核细胞白血病细胞株增殖抑制、周期分布、凋亡情况的影响,并探讨其作用机制。通过建立急性单核细胞白血病动物模型,考察三氧化二砷联合双氢青蒿素对急性单核细胞白血病的治疗作用。方法1.MTT法检测三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞的增殖抑制作用采用MTT法检测不同浓度的三氧化二砷、双氢青蒿素、三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞增殖的影响,计算其增殖抑制率,并计算三氧化二砷、双氢青蒿素的半数抑制浓度。2.流式细胞仪检测三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞周期分布及凋亡的影响THP-1细胞给予三氧化二砷、双氢青蒿素、三氧化二砷联合双氢青蒿素作用48 h后,应用流式细胞仪检测细胞增殖周期分布及凋亡的情况。3.Western Boltting检测三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞相关凋亡蛋白表达的影响THP-1细胞给予三氧化二砷、双氢青蒿素、三氧化二砷联合双氢青蒿素作用48h后,采用 Western Boltting 检测 Bax、Bcl-2、Caspase-3、Cleaved Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9六种凋亡相关蛋白的表达情况。4.MTT法检测三氧化二砷和双氢青蒿素对SHI-1细胞的增殖抑制作用采用MTT法检测不同浓度的三氧化二砷、双氢青蒿素、三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞增殖的影响,计算其增殖抑制率,并计算三氧化二砷、双氢青蒿素的半数抑制浓度。5.流式细胞仪检测三氧化二砷和双氢青蒿素对SHI-1细胞凋亡的影响SHI-1细胞给予三氧化二砷、双氢青蒿素、三氧化二砷联合双氢青蒿素作用48 h后,应用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。6.急性单核细胞白血病模型的建立BALB/c裸鼠,雌性,SPF级,4-5周龄,19只,检疫适应三天,分为五组:对照组、皮下注射THP-1细胞组、腹腔注射THP-1细胞组、皮下注射SHI-1细胞组、腹腔注射THP-1细胞组。观察急性单核细胞白血病细胞在裸鼠体内的生长情况。取裸鼠体内的急性单核细胞白血病细胞皮下注射到裸鼠体内,观察其增殖情况。7.基于裸鼠肿瘤模型考察三氧化二砷联合双氢青蒿素对急性单核细胞白血病的治疗作用建模:BALB/c裸鼠皮下注射SHI-1细胞建模。分组:将建模后裸鼠按肿瘤大小随机分为十组,分别是:对照组、模型组、ATO低组、ATO高组、DHA低组、DHA高组、ATO低+DHA低组、ATO低+DHA高组、ATO高+DHA低组、ATO高+DHA高组。给药14天。观察裸鼠状态、测量肿瘤大小、检测脏器病理变化。结果1.三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞的增殖抑制作用不同浓度的三氧化二砷、双氢青蒿素单用对THP-1细胞的增殖有明显的抑制作用（P<0.001）,且呈剂量-时间依赖性,三氧化二砷联合双氢青蒿素较三氧化二砷、双氢青蒿素单用后效果更加显着（P<0.001）。2.三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞周期分布及凋亡的影响与对照组相比,各给药组细胞G2和S期细胞明显减少,G1期细胞比例增加（P<0.001）,三氧化二砷联合双氢青蒿素组变化最大。与对照组相比,各给药组细胞凋亡比例均增加,三氧化二砷联合双氢青蒿素组凋亡比例较对照组提高了 71.4%,显着高于三氧化二砷组、双氢青蒿素组（P<0.001）。3.三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞相关凋亡蛋白表达的影响与对照组相比,同时将三氧化二砷联合双氢青蒿素组与三氧化二砷组、双氢青蒿素组比较,Bcl-2（P<0.05）、Caspase-3（P<0.001）、Caspase-8（P<0.001）表达量明显下调,Cleaved Caspase-3（P<0.05）表达量显着上调,Bax、Caspase-9表达量无明显变化。4.三氧化二砷和双氢青蒿素对SHI-1细胞的增殖抑制作用不同浓度的三氧化二砷、双氢青蒿素对SHI-1细胞增殖均有抑制作用,与对照组相比,随着药物浓度的增加,药物对SHI-1细胞的增殖抑制率升高（P<0.05）,且成浓度-时间依懒性。然而,分别用1、2、3μM的三氧化二砷联合不同浓度的双氢青蒿素,与同浓度的双氢青蒿素相比,抑制率并无明显变化（P<0.05）。5.三氧化二砷和双氢青蒿素对SHI-1细胞凋亡的影响与对照组相比,随着三氧化二砷浓度的增加,SHI-1细胞凋亡比例明显增加;随着双氢青蒿素浓度的增加,SHI-1细胞凋亡比例有增加趋势,但变化并不显着。与相同浓度的三氧化二砷或双氢青蒿素相比,三氧化二砷联合双氢青蒿素没有使SHI-1细胞凋亡比例增加。6.急性单核细胞白血病肿瘤模型的建立体外培养的SHI-1细胞和THP-1细胞腹腔注射到裸鼠体内均未有明显变化。体外培养的THP-1细胞皮下注射裸鼠右侧肩胛骨处可建立急性单核细胞白血病裸鼠肿瘤模型,成模率为25%。体外培养的SHI-1细胞皮下注射到裸鼠右侧肩胛骨处,可100%长出肿瘤,成功建立急性单核细胞白血病裸鼠肿瘤模型。7.基于裸鼠肿瘤模型考察三氧化二砷联合双氢青蒿素对急性单核细胞白血病的治疗作用与模型组,给药后7天,给药各组肿瘤体积增加均明显减小,其中ATO低+DHA低组减小最为明显,平均增加6.06 mm3。给药7至13天期间,肿瘤体积较前7天均明显增加,但ATO低+DHA低组增加值（120.25 mm3）较模型组（292.65 mm3）最低。给药14天后,与模型组相比,ATO低+DHA低组、ATO高+DHA低组、ATO高+DHA高组平均瘤重均明显降低,其中,ATO低+DHA低组降低最为显着,抑瘤率为46.47%。结论1.三氧化二砷和双氢青蒿素单用均能抑制THP-1细胞的增殖并成浓度-时间依赖性,且联合应用较各自单用抑制效果更加明显。2.阻滞细胞增殖周期及诱导细胞凋亡是三氧化二砷联合双氢青蒿素抑制THP-1细胞增殖的可能作用机制之一。3.三氧化二砷联合双氢青蒿素可能通过激活Caspase-3、下调Bcl-2和Caspase-8表达量诱导THP-1细胞凋亡。4.三氧化二砷和双氢青蒿素能够抑制SHI-1细胞的增殖并成浓度-时间依赖性,二者联用无协同作用。5.三氧化二砷可能通过诱导细胞凋亡抑制SHI-1细胞增殖;双氢青蒿素抑制SHI-1细胞不通过诱导细胞凋亡。6.体外培养的SHI-1细胞皮下注射到裸鼠右侧肩胛骨处可100%建立急性单核细胞白血病裸鼠肿瘤模型。7.2 mg/kg ATO与50 mg/kg DHA联合应用能够显着抑制急性单核细胞白血病裸鼠肿瘤模型肿瘤的生长,抑瘤率为46.47%。
尹婷[2]（2019）在《青蒿琥酯联合三氧化二砷诱导NB4细胞凋亡的线粒体通路的研究》文中提出目的本研究以人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4为研究对象,探讨青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用对NB4细胞凋亡的影响。通过检测青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用对NB4细胞的增殖、周期、凋亡、线粒体膜电位、线粒体内活性氧、相关mRNA以及相关蛋白的影响,探讨青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用能否通过激活人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4的线粒体凋亡途径而诱导细胞凋亡。方法1.青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用对NB4细胞的增殖抑制作用噻唑蓝法检测青蒿琥酯以及三氧化二砷单独与联合作用于NB4细胞后,对NB4细胞增殖的影响并计算其半数抑制浓度。2.青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用对NB4细胞周期及凋亡的影响流式细胞术检测青蒿琥酯以及三氧化二砷单独与联合作用于NB4细胞后,对NB4细胞周期及凋亡的影响。3.青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用对NB4细胞线粒体膜电位的影响JC-1法检测青蒿琥酯以及三氧化二砷单独与联合作用于NB4细胞后,对NB4细胞线粒体膜电位的影响。4.青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用对NB4细胞线粒体内活性氧的影响MitoSOX法检测青蒿琥酯以及三氧化二砷单独与联合作用于NB4细胞后,对NB4细胞线粒体内活性氧物质的影响。5.青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用对NB4细胞的相关mRNA影响qRT-PCR检测青蒿琥酯以及三氧化二砷单独与联合作用于NB4细胞后,对NB4细胞Bax与Bcl-2的mRNA转录影响。6.青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用对NB4细胞的相关蛋白影响Western blot检测青蒿琥酯以及三氧化二砷单独与联合作用于NB4细胞后,对 NB4 细胞 Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9 以及 Cyt-C 蛋白表达的影响。结果1.青蒿琥醋与三氧化二砷联合应用对NB4细胞的增殖抑制作用青蒿琥酯以及三氧化二砷单独作用于NB4细胞后,与对照组比较,具有明显的增殖抑制作用并具有浓度依赖性（P<0.05）,联合用药后较各自单用药的效果更加明显（P<0.05）。2.青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用影响NB4细胞周期和凋亡的情况青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用作用于NB4细胞后,与对照组相比,细胞G0-G1期比例明显升高（P<0.05）,细胞凋亡比例与对照组比较明显升高（P<0.05）。3.青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用影响NB4细胞线粒体膜电位的情况青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用作用于NB4细胞后,与对照组比较,细胞线粒体膜电位的表达明显下降（P<0.05）。4.青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用对NB4细胞线粒体内活性氧的影响青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用作用于NB4细胞后,与对照组比较,细胞线粒体内活性氧物质的含量明显升高（P<0.05）。5.青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用影响NB4细胞有关mRNA的情况青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用作用于NB4细胞后,与对照组比较,NB4细胞内Bcl-2 mRNA的转录明显下降（P<0.05）,Bax的mRNA的转录明显升高（P<0.05）。6.青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用影响NB4细胞有关蛋白的情况青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用作用于NB4细胞后,与对照组相比,NB4细胞内Bcl-2蛋白表达明显下调（P<0.05）,Bax、Caspase-3、Caspase-9以及Cyt-C蛋白表达明显升高（P<0.05）。结论1.青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用对NB4细胞增殖具有抑制作用,并能诱导细胞凋亡,具有一定的体外抑制急性早幼粒细胞白血病细胞的作用。2.将细胞周期阻滞于G0-G1期是青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用抑制细胞增殖的可能作用机制之一。3.青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用诱导NB4细胞凋亡的作用机制可能是通过激活线粒体凋亡信号通路而诱导细胞凋亡。4.青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用作用NB4,使线粒体内ROS浓度的升高、Bcl-2蛋白表达的下调、Bax蛋白表达的上调,可能与NB4线粒体凋亡通路的调节因素有关。
宋玉华[3]（2018）在《急性早幼粒细胞白血病凝血纤溶异常的研究》文中提出目的:早期出血是急性早幼粒细胞白血病（APL）的一个显着临床特征。几乎所有的APL患者初诊时伴有弥漫性血管内凝血及纤维蛋白溶解亢进的相关实验室检查证据。出血相关死亡是APL治疗失败的最常见原因。独特的凝血和纤溶异常和APL患者早期出血症状密切相关。通过研究APL患者早期出血症状和临床观测指标的相关性,不仅有利于疾病的诊断,而且可以为疾病的治疗提供更多的依据。追踪观察不同危险分层APL患者诱导治疗期间血小板计数及其凝血纤溶指标的变化趋势,以指导临床减少APL的出血并发症及其相关病死率。方法:选择2009年5月至2016年4月在南京医科大学第一附属医院收治的112例初诊APL患者,其中男性66例,女性46例,年龄12?75岁,中位年龄为41岁。根据Sanz风险分层,低危患者22例、中危患者63例、高危患者27例。所有患者予ATO+ATRA双诱导治疗至骨髓达完全缓解（CR）。回顾性统计病例的年龄、性别、临床特征（早期出血事件,早期死亡事件）、实验室指标[白细胞（WBC）计数、血红蛋白（HB）水平、血小板（PLT）计数、凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（Fbg）、D-二聚体（D-D）、乳酸脱氢酶（LDH）和骨髓白血病早幼粒细胞（BMP）百分比]。统计分析APL患者出血症状发生的相关因素及高危患者的伴随指标特征。追踪分析不同危险分层APL患者双诱导治疗期间血小板计数,凝血酶原时间,活化部分凝血活酶时间,纤维蛋白原,D-二聚体指标变化趋势。结果:致死性重要脏器出血,尤其是颅内出血（75%,3/4）,仍是APL患者的早期死亡主要原因。APL患者出血症状的发生与减低的血小板计数和纤维蛋白原水平显着相关。高危组APL患者白细胞（WBC）,乳酸脱氢酶（LDH）,凝血酶原时间（PT）,纤维蛋白原和骨髓白血病早幼粒细胞比例相较于低/中危组有统计学差异。经三氧化二砷和全反式维甲酸双诱导治疗后凝血指标改善显着。不同危险组APL患者经诱导治疗后血小板（PLT）,凝血酶原时间（PT）,活化部分凝血活酶时间（APTT）,D-二聚体和纤维蛋白原变化无统计学差异。D-二聚体初始水平高,经诱导治疗四周后,仍维持在较高水平。结论:1,APL患者常存在凝血纤溶异常,早期出血相关死亡仍然是APL的治疗挑战,其中纤溶亢进是APL早期出血综合征中更为重要的因素。2,疑诊APL患者立即开始双诱导（ATO+ATRA）治疗,可有效缓解APL患者的凝血纤溶障碍。3,积极地预防性输注血制品维持较高水平的血小板和纤维蛋白原可防止APL患者重要脏器出血,减少早期死亡发生率。目的:通过细胞共培养模拟体内环境,探讨三氧化二砷（ATO）对于急性早幼粒白血病细胞株NB4与人脐静脉血管内皮细胞HUVEC共培养体系纤溶活性的影响及可能机制。方法:用CCK-8法测定了三氧化二砷对NB4、HL-60、HUVEC细胞增殖的影响,选择合适的实验浓度及时间点。用流式细胞术Annexin V FITC/PI双染色法检测NB4、HL-60、HUVEC细胞凋亡。利用NB4与HUVEC共培养24小时,以同期单独培养的NB4、HUVEC作为对照,采用酶联免疫吸附实验（enzymelinked immunosorbent assay,ELISA）检测ATO处理前后共培养组和对照组细胞培养上清中tPA、PAI-1、uPA的蛋白分泌水平,同时采用实时定量聚合酶链反应（real-time quantitative polymerase chain reaction）检测ATO处理前后NB4、HUVEC和共培养组AnnexinⅡmRNA的含量;应用SPSS statistics 16软件对所得数据进行统计学分析,分别采用t检验进行显着性检验,P<0.05有显着性统计学差异。结果:1,ATO以时间和剂量效应关系抑制NB4、HL-60、HUVEC细胞增殖,ATO促进NB4、HL-60、HUVEC细胞凋亡,其中NB4对ATO抑制增殖促进凋亡的作用尤为敏感。2,NB4、HUVEC及共培养组在ATO处理后t-PA、uPA表达均明显下降,PAI-1表达水平均明显升高,差异均有显着性（P<0.05）。各组加药前t-PA、PAI-1、uPA表达无明显差异（P均<0.05）,加药后各组PAI-1表达无明显差异,而tPA蛋白水平,ATO处理后共培养组与同期单独培养的HUVEC相比,有显着差异（P<0.05）。uPA蛋白水平,ATO处理后共培养组与单独培养的NB4、HUVEC相比,有显着差异（P<0.05）。3,ATO处理可显着抑制NB4、HUVEC及共培养组细胞AnnexinⅡmRNA含量（P均<0.05）,对共培养组AnnexinⅡmRNA含量的抑制尤为显着。结论:1,ATO可以通过抑制NB4、HUVEC细胞tPA、uPA的表达和AnnexinⅡmRNA来抑制APL的高纤溶活性。2,NB4和HUVEC共培养可能对ATO抗纤溶效应存在协同增效作用。
常虹[4]（2015）在《原发性肝癌“毒瘀互结”的病机理论及丹参酮胶囊联合三氧化二砷干预机制的研究》文中认为目的:（1）探讨分析原发性肝癌毒瘀互结的病机特点。（2）通过实验研究,丹参酮胶囊联合三氧化二砷诱导人肝癌bel-7404细胞凋亡及其机制,从分子角度佐证原发性肝癌病因病机的特点。方法:采用文献分析与实验相结合的研究方法。（1）文献研究:通过原发性肝癌古今文献的系统梳理,对肝癌病名进行了考证,并详尽阐述了原发性肝癌毒瘀互结的病因病机,在此基础上,确立治疗法则及用药。（2）实验研究:①采用CCK-8法检测丹参酮胶囊联合三氧化二砷对肝癌bel-7404细胞、人肝正常LO2细胞的增殖抑制情况,流式细胞仪检测对其凋亡的影响;②采用Western Blot法检测丹参酮胶囊联合三氧化二砷对肝癌bel-7404细胞凋亡蛋白的表达,如Bcl-2、XIAP、Survivin、Bax、PARP、caspase-9、caspase-3 等;(三采用 Western Blot法检测丹参酮胶囊联合三氧化二砷对肝癌bel-7404细胞MAPK信号转导通路的影响。结果:（1）文献研究表明:医学经典专着《黄帝内经》中,已有原发性肝癌的类似记载。其机制主要是在外感邪毒、劳倦内伤、饮食、情志等致病因素的基础上,酿生癌毒,以正气不足为内在条件,瘀毒互结,形成肿瘤。肝藏血,体阴而用阳,藏血而调血,肝脏肿瘤与血瘀的关系尤为密切。“毒”“瘀”“虚”贯穿肝癌发生发展的全过程,构成肝癌病机复杂性,治疗应抓住主要矛盾,切中病机,以毒攻毒、化瘀扶正,结合现代科技研究成果,选用三氧化二砷攻克癌毒,丹参酮胶囊化瘀扶正,两药联合,协同增效,起到了标本同治的效果。（2）实验研究:①细胞增殖抑制实验,以2μm/L浓度的三氧化二砷处理bel-7404细胞24h,以2.5、5、10、20μg/mL等不同浓度的丹参酮胶囊处理bel-7404细胞24h,丹参酮胶囊单药组随药物浓度提高抑制率增加;2+2.5、2+5、2+10、2+20（μm/L+μg/mL）联合组对bel-7404细胞的生长抑制作用,随浓度的增加而增加;2+2.5、2+5、2+10、2+20（μm/L+μg/mL）联合组对肝正常L02细胞的生长抑制作用,2+2.5、2+5（μm/L+μg/mL）低浓度联合组未见明显的抑制作用,而2+10、2+20（μm/L+μg/mL）高浓度联合组出现明显的生长抑制作用,分别达到29.7±1.9%、42.8±2.7%。选5μg/mL丹参酮胶囊+2μm/L ATO联合进行后期实验。流式细胞检测,联合组作用bel-7404细胞24h,早期凋亡率49.4%,与单独用药比较,差异有统计学意义（P<0.01）②Western Blot法检测联合组对肝癌bel-7404细胞作用24h,明显抑制Bcl-2、XIAP、Survivin等凋亡抑制蛋白表达,与对照组、单药组比较差异有统计学意义（P<0.01）,caspase-9、caspase-3和PARP切割片段明显增加,而单独用药组的蛋白变化不明显。③Western Blot法检测联合组作用肝癌bel-7404细胞12h,p-JNK、p-P38蛋白表达增高与对照组、单药组比较差异有统计学意义（P<0.01）;p-ERK蛋白表达下降,与对照组和丹参酮胶囊单药组比较有统计学意义（p<0.01）,而与砷剂单药组比较无统计学意义（P>0.05）。用JNK特效抑制剂SP600125（20μm）处理细胞后,可显着减少联合组p-JNK蛋白的表达,抑制JNK磷酸化,同时抑制下游caspase-9、caspase-3蛋白活化。结论:（1）“毒”“瘀”“虚”胶合蕴结为原发性肝癌病因病机特点,正气不足为内在前提,癌毒肆虐是肝癌发生发展的启动因素,脉络瘀滞贯穿疾病始终,因此,针对治疗原发性肝癌毒瘀互结的病机特点,选用三氧化二砷以毒攻毒,丹参酮胶囊化瘀扶正,二者联合使用可以起到毒瘀同治的作用,并且丹参酮胶囊有望成为提高三氧化二砷化疗敏感性的有效药物。（2）丹参酮胶囊联合三氧化二砷作用人肝癌bel-7404细胞,联合增效作用可能主要通过激活JNK通路,偶联P38MAPK通路,同时下调Bcl-2、XIAP、Survivin等凋亡抑制蛋白,活化下游caspase-9、caspase-3等诱导细胞发生凋亡。研究低毒、高效的中药联合化疗方案,多靶点、多通路诱导肝癌细胞凋亡,为提高低剂量三氧化二砷的临床疗效奠定理论基础;应用现代分子生物学技术揭示联合增效的作用及相关机制,既阐明了肝癌毒瘀互结之病机内涵,又为临床抗肝癌治疗提供可资借鉴的方法和思路。
王叨[5]（2015）在《丹参酮ⅡA对ATO抗人急性早幼粒细胞白血病的化疗增敏作用及其机制的实验研究》文中指出背景急性早幼粒细胞白血病（Acute promyelocyte leukemia,APL）是急性髓系白血病（acute myelogenous leukemia,AML）的特殊亚型,特征是骨髓中早幼粒阶段的粒细胞发育分化停滞、恶性克隆增殖。全反式维甲酸（all-trans retinotic acid ATRA）和三氧化二砷（arsenic trioxide,ATO）是治疗APL的有效药物,可使APL患者的完全缓解率高达90%95%,但已出现部分患者对该两种药物耐药和治疗后复发的陆续报道,进一步研究发现这部分患者的耐药机制与细胞凋亡缺陷有关,因而再使用ATRA及ATO也很难再次获得缓解,难治性APL目前仍然是诸多学者、专家面临的难题。因此,积极探索化疗药物抗肿瘤的新机制及寻找和研发高效低毒的治疗或辅助治疗APL药物已迫在眉睫。细胞凋亡（apoptosis）是细胞内预存的死亡程序被触发而导致的细胞主动死亡过程,凋亡失衡是肿瘤发生的重要机制。近十年来,学者们研究发现,除了凋亡,自噬也参与肿瘤的病理生理机制。自噬是依赖溶酶体途径的胞内分解过程,通过降解胞内错误折叠蛋白、受损的细胞器等,及时清除那些具有潜在细胞毒性的细胞成分堆积,使细胞快速适应细胞内外环境的变化,是细胞应对不良环境的一种防御机制。自噬对细胞存活起双刃剑作用,适度的自噬可维持亚细胞水平结构的更新和重建、利于细胞存活,但过度的自噬则可诱导细胞发生自噬性死亡,因不同于凋亡,故称为II型程序性死亡。激活自噬活性、诱导自噬性死亡可作为一种有价值的增强抗肿瘤疗效的新方法。大多研究认为诱导凋亡和细胞自噬性死亡是大多抗肿瘤药物发挥药效的主要作用机制。丹参酮ⅡA（Tanshinone ⅡA,Tan ⅡA）是从丹参中分离出的二萜醌类化合物,临床主要用来治疗心血管疾病和脑缺血性卒中,近年研究发现它对多种肿瘤细胞具有抗增殖活性。目前关于Tan ⅡA抗肿瘤的具体机制尚不十分清楚,以往的研究大多集中在凋亡方面,而有关自噬在Tan ⅡA抗肿瘤机制及协同化疗药物化疗增敏机制中的作用的相关文献报道甚为罕见。目的从细胞凋亡和自噬角度,探讨Tan ⅡA、Tan ⅡA联合ATO对急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4生长的影响作用及其可能的分子机制和调控机制;建立人急性早幼粒细胞性白血病裸鼠模型,探讨Tan ⅡA、Tan ⅡA联合ATO在活体内对NB4移植瘤生长的影响作用及其分子机制,为临床采用Tan ⅡA治疗或辅助治疗白血病策略提供实验和理论依据。方法体外实验部分:（1）体外培养人急性早粒幼细胞白血病NB4细胞株,将对数生长期NB4细胞分为6组,分别加入4、8、16mg/ml Tan ⅡA、0.5mg/ml ATO及8mg/ml Tan ⅡA+0.5mg/mlATO,对照组加入等体积的生理盐水;（2）CCK-8法检测一定时间点上各组细胞增殖活力;凋亡抑制剂z-VAD-fmk或自噬抑制剂3-MA预孵育NB4细胞1h后,再加入8、16mg/ml Tan ⅡA处理,CCK-8法分别检测它们对Tan ⅡA抗NB4细胞增殖作用的影响;（3）流式细胞术检测各组NB4细胞的凋亡率和自噬率;（4）Western blotting检测凋亡特异蛋白Caspase-3及自噬特异蛋白Beclin-1、LC3-II、P62的表达水平;（5）Western blotting检测PI3K-I/Akt/mTOR信号通路蛋白的磷酸化水平;（6）RT-PCR法检测beclin-1 mRNA、bcl-2 mRNA的转录水平。体内实验部分:（1）将人急性早粒幼细胞白血病NB4细胞接种于BALB/C-nu/nu裸鼠皮下,建立荷人急性早幼粒白血病NB4细胞移植瘤裸鼠模型;（2）随机将30只接种NB4细胞的裸鼠分为4组:Tan ⅡA组、ATO组、Tan ⅡA联合ATO组、生理盐水对照组,腹腔注射法给予实验设定药物;（3）用游标卡尺测量移植瘤块的平均体积,绘制移植瘤生长曲线;（4）给药后的第15天,处死裸鼠并称重剥离瘤块,比较各组抑瘤率（%）;（5）瑞氏、HE染色后,光学显微镜下观察各组裸鼠的骨髓、心、肝、肾、淋巴结等重要组织器官有无病理学损害;（6）Western blotting检测各组移植瘤组织中凋亡特异蛋白Caspase-3、自噬特异蛋白LC3-II的表达水平。结果体外实验部分:（1）Tan ⅡA对NB4增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖性,联合用药组对NB4细胞增殖的抑制率大于Tan ⅡA、ATO单药组,差异具有统计学意义（P<0.01）;（2）凋亡抑制剂z-VAD-fmk预孵育干预后,Tan ⅡA组NB4细胞的增殖抑制率较干预前明显降低,差异具有统计学意义（P<0.05）;（3）自噬抑制剂3-MA预孵育干预后,Tan ⅡA组NB4细胞的增殖抑制率较干预前增加10%以上,差异具有统计学意义（P<0.05）;（4）Tan ⅡA可诱导NB4细胞发生凋亡和自噬,均呈时间和浓度依赖性;联合用药组诱导NB4细胞的凋亡率和自噬率均大于Tan ⅡA、ATO单药组（P<0.01）;（5）Western blotting检测结果显示,Tan ⅡA联合ATO组NB4细胞中凋亡特异蛋白Caspase-3和自噬特异性蛋白Beclin-1和LC3-II的相对表达量高于对照组,亦高于Tan ⅡA、ATO单药组,差异具有统计学意义（P<0.05）;联合用药组NB4细胞中自噬特异蛋白P62的表达量明显低于对照组,亦明显低于Tan ⅡA、ATO单药组,差异均具有统计学意义（P<0.05）;（6）Western blotting检测结果显示,Tan ⅡA联合ATO组NB4细胞中p-PI3K-I、p-Akt和p-mTOR蛋白条带相对表达量较对照组增高,亦高于Tan ⅡA、ATO单药组,差异均具有统计学意义（P<0.01）;（7）RT-PCR检测结果显示,Tan ⅡA联合ATO组NB4细胞中beclin-1 mRNA转录水平较对照组增高,亦高于Tan ⅡA、ATO单药组,差异均具有统计学意义（P<0.05）;Tan ⅡA联合ATO组NB4细胞中bcl-2 mRNA转录水平较对照组降低,亦低于Tan ⅡA、ATO单药组,差异均具有统计学意义（P<0.05）。体内实验部分:（1）将高致瘤性人急性早幼粒细胞白血病NB4细胞（4×106个）接种于BALB/C-nu/nu裸鼠皮下,成瘤率100%,成功建立了人急性早幼粒细胞白血病移植瘤动物模型;（2）Tan ⅡA组移植瘤体积增长速度略慢于对照组,差异无有统计学意义（P>0.05）,Tan ⅡA联合ATO组不仅明显慢于对照组,也明显慢于Tan ⅡA单药组和ATO单药组,差异均具有显着性（P<0.05）;（3）Tan II单药组NB4移植瘤的平均重量低于对照组,差异不具有统计学意义（P>0.05）;联合用药组NB4移植瘤的平均重量不仅显着低于对照组,亦显着低于Tan ⅡA单药组和ATO单药组,差异均具有显着性（P<0.05）;联合用药组的抑瘤率为27.16%,显着高于ATO单药组的15.74%和Tan ⅡA单药组的6.79%;（4）光学显微镜下观察到Tan ⅡA联合ATO方案对裸鼠的骨髓、心、肝、肺、肾、淋巴结等重要组织器官无明显病理学损害;（5）Tan ⅡA联合ATO组NB4移植瘤组织中Caspase-3、LC-II的相对表达量不仅明显高于对照组,亦明显高于Tan ⅡA单药组和ATO单药组,差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论（1）Tan ⅡA对人急性早幼粒白血病NB4细胞有抗增殖作用,并呈一定的时间和浓度依赖性;Tan ⅡA可协同增强ATO对NB4细胞增殖的抑制作用,具有化疗增敏效应;（2）Tan ⅡA呈时间和剂量依赖性诱导NB4细胞发生凋亡和自噬,Tan ⅡA协同ATO诱导NB4细胞凋亡和自噬作用大于ATO单药组;（3）Tan ⅡA联合ATO上调凋亡特异蛋白Caspase-3表达的作用大于ATO单药组和Tan ⅡA单药组,增强凋亡诱导效应是Tan ⅡA协同ATO化疗增敏机制之一;（4）Tan ⅡA协同ATO上调自噬特异蛋白Beclin-1、LC3-II表达,诱导NB4细胞发生自噬性死亡的作用大于ATO单药组和Tan ⅡA单药组,增强自噬诱导效应也是Tan ⅡA协同ATO化疗增敏机制之一;（5）Tan ⅡA联合ATO通过抑制PI3K-I/Akt/mTOR信号通路、调控Bcl-2家族蛋白基因转录水平,促进NB4细胞发生凋亡和自噬性死亡——这是Tan ⅡA联合ATO化疗增敏的上游调控机制;（6）Tan ⅡA联合ATO方案治疗NB4移植瘤具有化疗增敏疗效,且安全有效;（7）Tan ⅡA联合ATO可上调移植瘤组织中凋亡特异蛋白Caspase-3、自噬特异蛋白LC3-II的表达水平,增强瘤细胞的凋亡和自噬活性,诱导细胞程序性死亡是其在活体内抗白血病化疗增敏的可能机制。（8）诱导凋亡和自噬性死亡、共同促进细胞死亡是Tan ⅡA协同ATO体内外抗白血病化疗增敏的可能机制。
董怡[6]（2014）在《三氧化二砷纳米粒对NB4细胞PTEN蛋白和线粒体凋亡途径的影响》文中提出本实验采用溶胶-凝胶法制备As2O3纳米粒，通过MTT法比较As2O3纳米粒和As2O3对NB4细胞的增殖抑制作用；通过Hoechst和PI染色、流式细胞仪（Flow cytometry,FCM）观察检测As2O3纳米粒和As2O3对NB4细胞的凋亡作用；通过罗丹明123染色检测两种剂型对NB4细胞的线粒体膜电位的影响；通过Western blot观察两种剂型作用NB4细胞后细胞内p-PTEN、p-AKT、Bax、caspase-3、caspase-9和AIF的表达变化，初步探讨As2O3纳米粒对NB4细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用机制。细胞增殖抑制实验结果显示As2O3纳米粒和As2O3对NB4细胞均可产生抑制作用，且呈时间浓度依赖性；药物浓度和作用时间相同时，As2O3纳米粒对NB4细胞的生长抑制作用明显强于As2O3。细胞凋亡实验结果显示，As2O3纳米粒和As2O3作用NB4细胞后主要表现为凋亡，相同作用时间下，随药物浓度增加，凋亡率增加，且纳米粒组凋亡率明显多于传统剂型As2O3组。罗丹明123染色实验结果显示两种剂型均可降低NB4细胞的线粒体膜电位，且呈浓度依赖性；相同药物浓度和作用时间下，As2O3纳米粒对NB4细胞的作用明显强于As2O3。Western blot结果显示，与同浓度As2O3比较，1.5μmol/L、3μmol/L As2O3纳米粒能显着下调p-AKT和PTEN的表达；相同浓度时，As2O3纳米粒较As2O3明显增加p-PTEN和Bax的表达，且呈浓度依赖性；1.5μmol/L和3μmol/LAs2O3caspase-3、caspase-9的表达量呈浓度依赖性增加，1.5μmol/L As2O3纳米粒较同浓度三氧化二砷表达量增加，而3μmol/LAs2O3纳米粒组caspase-3、caspase-9的表达量较同浓度三氧化二砷降低。随后继续研究了AIF的表达变化，结果显示3μmol/L As2O3纳米粒组AIF的表达量增加。因此，根据实验结果推测三氧化二砷和低浓度三氧化二砷纳米粒主要通过依赖caspase的线粒体凋亡途径诱导NB4细胞凋亡，而高浓度三氧化二砷纳米粒主要通过非依赖caspase的线粒体凋亡途径诱导NB4细胞凋亡。根据上述实验结果得出以下结论：⑴As2O3纳米粒和As2O3对NB4细胞的生长有抑制作用，呈时间和浓度依赖性，且As2O3纳米粒对NB4细胞的作用明显强于As2O3；⑵As2O3纳米粒和As2O3诱导NB4细胞凋亡呈浓度依赖性；且As2O3纳米粒的诱导凋亡作用更为显着；⑶As2O3纳米粒对NB4细胞诱导凋亡作用强于As2O3，可能与上调p-PTEN的表达、抑制AKT的活化和启动线粒体凋亡途径有关。
王翠翠[7]（2012）在《川芎嗪对NB4细胞端粒酶活性的影响及其抗肿瘤分子机制的研究》文中指出目的：通过检测川芎嗪（TMP）对NB4细胞增殖、凋亡及端粒酶活性的影响,以及对人端粒酶逆转录酶（hTERT）、c-myc mRNA表达水平的影响，探讨TMP抗肿瘤的作用机制。方法：采用MTT法检测不同浓度（100ug/ml、300ug/ml、500ug/ml）不同作用时间（24h、48h、72h）的TMP对NB4细胞增殖的影响；流式细胞术（FCM）Annexin V-FITC／PI双染法检测细胞凋亡率；TRAP-PCR银染法定性检测端粒酶活性；TRAP-PCR-ELISA法定量检测端粒酶活性；RT-PCR法检测hTERT、c-myc mRNA表达。结果：MTT结果显示浓度100ug/ml-500ug/ml的TMP能明显抑制NB4细胞的增殖，且其抑制作用呈剂量时间依赖性；流式细胞术结果显示浓度300ug/ml、500ug/ml的TMP作用NB4细胞48h、72h后，细胞凋亡率显着升高（P﹤0.05）；PCR-TRAP银染法定性检测端粒酶活性结果显示各浓度组的TMP作用NB4细胞72h后，条带明显变浅；PCR-TRAP-ELISA法定量检测端粒酶活性结果显示各浓度组的TMP作用NB4细胞72h后，端粒酶活性（A450nm）显着降低（P﹤0.05）；RT-PCR结果显示NB4细胞的hTERT、c-myc mRNA表达水平随TMP浓度增加、作用时间延长逐渐降低，且二者降低程度呈正相关。结论：本实验显示在NB4细胞中TMP通过下调c-myc的表达来抑制细胞增殖和促进细胞凋亡，同时下调hTERT的表达来降低NB4细胞端粒酶活性以发挥其抗肿瘤的作用。
李静,曹云新,郝锦霞,刘陕西[8]（2009）在《对比硫化砷对两种白血病细胞株凋亡和hTERT-mRNA表达的影响》文中指出目的:对比硫化砷对慢性粒细胞白血病细胞株K562和急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4两种细胞的作用是否存在差异及其机制。方法:PCR-ELISA法测定端粒酶活性;半定量RT-PCR检测hTERTmRNA的表达;流式细胞术测量细胞周期、凋亡。结果:0.15～0.6mg/L硫化砷（72h）可在诱导NB4细胞凋亡的同时,下调细胞端粒酶活性和hTERT-mRNA表达,同样作用对于K562细胞需要硫化砷浓度达到0.3～3mg/L。0.3mg/L硫化砷（72h）可引起NB4细胞出现G2/M期细胞比例增高。而K562细胞需要在1.5mg/L硫化砷诱导下出现G2/M期细胞比例增高。结论:端粒酶系统可能是硫化砷诱导NB4和K562细胞凋亡的途径之一;由硫化砷诱导的G2/M期阻滞可能与端粒酶活性的显着下降相关。NB4和K562细胞对硫化砷的敏感性存在明显差异,具体机制有待进一步研究。
马云[9]（2009）在《丹参酮与三氧化二砷协同诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株分化与凋亡的体外研究》文中进行了进一步梳理背景自上个世纪80年代以来,我国学者先后发现全反式维甲酸（ATRA）和三氧化二砷（As2O3）能诱导急性早幼粒细胞白血病（APL）细胞分化和凋亡,极大地提高了APL的完全缓解（CR）率。但随着广泛的临床应用,两种药物已出现耐药报道,同时其不良反应也逐渐被人们认识,因此迫切需要开发新的高效低毒的药物以克服APL的耐药及毒副反应。丹参酮ⅡA （Tanshinone, TanⅡA ）为丹参的乙醚提取物,是丹参的主要有效成分,近年研究表明,TanⅡA可以通过对肿瘤细胞的杀伤、诱导分化和凋亡、抑制侵袭和转移的机制发挥抗肿瘤作用。本院对于APL患者常规会应用到丹参这一药物,目的是预防及治疗DIC,同时使用As2O3治疗APL,CR率达100%,无一例早期死亡,疗效高于以往文献报道,这一现象似乎提示联合应用TanⅡA,与As2O3有协同作用,可提高As2O3的抗肿瘤效应,但缺乏理论依据及实验基础。目的为评估TanⅡA与As2O3联合应用的效应,观察二药的相互作用和相互影响,并探讨其诱导分化及凋亡的机制,期望对两药的临床应用提供理论依据。方法以不同浓度的As2O3、TanⅡA单独及联合应用作用于NB4细胞株作为实验组,通过观察细胞的生长状况、形态学改变、MTT增殖抑制实验测定细胞存活率,并采用流式细胞术（FCM）检测细胞膜表面分化抗原（CD11b）及细胞周期分布,分析不同浓度的As2O3、TanⅡA单独及联合应用对NB4细胞的增殖、分化及凋亡的影响。结果TanⅡA、As2O3均能抑制NB4细胞生长,以1.0μmol/L As2O3作用更显着,二者联合应用后的增殖抑制作用表现为协同效应;经TanⅡA组处理后的NB4细胞,其形态改变更多显示一定程度的成熟粒细胞的特征:细胞体积变小,核浆比例缩小,染色质密集、结块,胞浆呈泡沫感,可见到部分中、晚幼粒细胞,As2O3组则更多表现为细胞凋亡的形态学改变:核染色质固缩、核碎裂,形成凋亡小体,并经电镜检查证实,两药联合应用可加强NB4细胞的凋亡形态改变;FCM检测细胞表面分化抗原,结果显示TanⅡA的诱导分化能力更强,以0.5μg/ml组为着,联合应用As2O3可拮抗其诱导分化能力,相反TanⅡA则可促进As2O3对NB4细胞的诱导分化作用;处理后的NB4细胞G0/G1期比例增高,S期细胞比例降低,细胞增殖指数（PI）下降,两药联合应用后具有协同效应。结论1. TanⅡA、As2O3对NB4细胞均有增殖抑制作用,1.0μmol/L As2O3对NB4细胞增殖抑制作用最显着,As2O3对TanⅡA的增殖抑制作用具有协同效应,并与剂量相关,较大剂量的TanⅡA也可增强As2O3对NB4细胞的增殖抑制作用。2. TanⅡA与As2O3联合作用于NB4细胞具有诱导凋亡、促进分化的双重作用,As2O3可以促进TanⅡA对NB4细胞的诱导凋亡作用,拮抗其诱导分化能力;同时,TanⅡA亦可以促进As2O3对NB4细胞的诱导分化作用,对As2O3的诱导凋亡能力具有协同效应。3.小剂量的As2O3联合TanⅡA即可对NB4细胞产生诱导分化、促进凋亡的双重效应,故临床可以选择小剂量的As2O3,以减轻砷剂的毒副作用。4.本实验对TanⅡA、As2O3的增殖抑制、诱导分化、促凋亡的药理作用的研究,为今后两药的临床联合应用提供了理论依据及实验基础。
刘志宇[10]（2008）在《低剂量砷剂联合Cyclopamine对前列腺癌细胞株PC-3生长影响机制的初步研究》文中提出前列腺癌（Prostatic cancer,Pca）为西方国家最常见的恶性肿瘤,近十年我国Pca的检出率也明显上升,已位居泌尿系统肿瘤的第三位,其大多数都依赖于雄激素,但14—30个月后,几乎所有患者病变都将发展为激素非依赖性Pca,目前尚没有公认的有效的治疗非雄依赖Pca的手段和药物。自1996年哈医大首先报道静滴三氧化二砷（Arsenic trioxide,As2O3）治疗复发的急性早幼粒细胞白血病（APL）达到很高的完全缓解率以来,国内外学者对其抗肿瘤机制进行了广泛而深入的研究,已证实As2O3对多数肿瘤（包括实体瘤）有效,但对于非雄依赖的Pca及基因和端粒酶方面的研究甚少,故我们拟进一步探讨As2O3对前列腺癌非雄细胞系周期阻滞、凋亡及端粒酶活性的影响。同时,近年来的研究发现,Hedgehog（Hh）通路的激活在内胚层肿瘤包括的发生、发展中起重要作用,有学者称Hh信号通路可能是我们所了解的PCa发病的更可靠的机理,环杷明（Cyclopamine）是Hh通路的拮抗剂,本实验拟进一步印证Cyclopamine对前列腺癌非雄依赖细胞系PC-3细胞的影响及作用机制,为以后的联合用药及动物实验奠定基础。砷剂是一个剧毒化合物,Cyclopamine亦有导致动物畸形的报道,其用药的安全性是人们首要关注的问题之一,若通过前期试验进一步证实As2O3或Cyclopamine均可引起PCa非雄依赖的PC-3细胞的凋亡和周期抑制,并且分别或是均能抑制端粒酶及信号通路的活性,那么将As2O3同Cyclopamine联合应用,是否可以通过降低剂量而降低毒性和潜在副作用,同时又在前列腺癌非雄依赖细胞的研究中有着更好的抗肿瘤作用,从而成为更有效、更安全的非雄依赖的前列腺癌的中西医结合的治疗手段,需要实验进一步的探讨。本实验共分为四个部分:第一部分:三氧化二砷对前列腺癌PC-3细胞系细胞周期及端粒酶活性的影响我们应用体外细胞生长抑制试验（MTT比色法）研究对PC-3细胞生长的影响;流式细胞仪检测细胞周期分布情况及凋亡情况;TRAP-ELASA方法检测药物作用前后端粒酶的活性。MTT结果发现,6μmol/l As2O3对PC-3细胞即具有抑制作用,随着浓度的增加和作用时间的延长,抑制作用进一步增强,作用48小时,IC50为16.21μmol/L。18μmol/L的As2O3与PC-3细胞共培养48h后,电镜下部分癌细胞出现凋亡形态学改变,经6μmol/L、12μmol/L、18μmol/L、24μmol /L的As2O3作用48h后,细胞凋亡率逐渐增加,在流式图上可见到代表凋亡的亚G1峰,且24μmol/L组、18μmol/L组、12μmol/L组的As2O3组细胞凋亡率明显高于6μmol/组（P<0.05）。四组浓度处理后的PC-3细胞凋亡率分别为4.8%,15.2%, 19.6% ,29.7%,同正常组比较有显着性差异（P<0.01）,G0/G1期细胞比例明显增加,而S期和G2/M期细胞明显减少。PC-3细胞端粒酶活性随着作用时间及作用浓度的增加而降低,具有时间剂量效应关系,但当浓度增加至18μmol/L以上时,随着浓度的增加,对端粒酶活性的抑制无显着性差异（P>0.05）。第二部分:三氧化二砷对前列腺癌DU-145细胞周期阻滞及凋亡的影响DU-145也是非雄依赖的前列腺癌细胞系,研究结果发现,As2O3对DU-145细胞生长具有抑制作用,2μmol/L的As2O3作用24h即对DU-145细胞具有抑制作用,当浓度增加至6μmol/L以上时,抑制作用更为明显,作用48小时,IC50为8.02μmol /L,作用72小时IC50为6.21μmol /L;电镜观察DU-145细胞超微结构发现:8.0μmol/L的As2O3与DU-145细胞共培养48h后,部分癌细胞出现凋亡形态学改变,晚期可产生凋亡小体。流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期的分布发现经6、8、10μmol/L的As2O3作用48h后, DU-145细胞凋亡率明显增加,与空白对照组比较有显着性差异（P<0.01）, G0/G1期细胞比例明显下降,而G2/M期细胞比例明显增加,和对照组相比有显着性差异（P<0.01）,在48小时2μmol/LAs2O3作用组未见代表细胞凋亡的亚G1峰,而在8μmol/L作用组,在正常二倍体峰前面可看到一个明显的代表凋亡的亚G1峰;As2O3处理DU-145细胞基因组DNA电泳结果发现:不同浓度的As2O3处理DU-145细胞48h后,基因组DNA凝胶电泳呈现明显的梯状图谱,这是核小体间DNA成180-200bp整倍断裂的结果。第三部分:Cyclopamine对非雄依赖的前列腺癌PC-3细胞的影响通过MTT检测Cyclopamine对细胞生长增殖的影响,BrdU掺入检测PC-3细胞DNA合成的情况,流式检测Cyclopamine对PC-3细胞周期的影响, TRAP-ELISA法细胞检测端粒酶的活性。实验结果显示:Cyclopamine可以通过抑制Hh信号转导通路而明显抑制PC-3细胞的增殖,在4-8μmol/L有明显的抑制作用; BrdU掺入结果PC-3细胞未加Cyclopamine时BrdU掺入阳性细胞平均约占细胞总数的79%±5.6,加入2μmol/L的Cyclopamine作用48小时后PC-3细胞BrdU掺入阳性细胞平均约占细胞总数的49%±8.3,低于对照组79 %±5.6 （P<0.05 ）,加入4μmol/L的Cyclopamine作用48小时后PC-3细胞BrdU掺入阳性细胞平均约占细胞总数的30%±6.8,明显低于对照组（P<0.01）,但加入Tomatidine（Cyclopamine类似物）作用48小时后BrdU掺入阳性细胞平均约占细胞总数的72%±6.9,与对照组相比差异无显着性（P>0.05）;流式细胞仪检测细胞周期的结果为:4μmol/L的Cyclopamine作用48 h后,PC-3细胞进入S期比例由空白对照组的34.8%±1.13下降为13.7%±0.18,G1期的细胞比例由空白对照组的46.8%±1.32下降为34.8%±0.78, G2期的细胞比例由空白对照组的19.7%±0.49上升为52.4%±0.56, Cyclopamine处理组在流式图上还出现了明显的凋亡峰;Cyclopamine对PC-3细胞端粒酶活性在低浓度和高浓度时均无明显抑制作用,并且随着作用时间的延长,亦无抑制作用。第四部分:低剂量砷剂联合Cyclopamine对前列腺癌细胞株PC-3生长影响的研究通过MTT检测不同浓度砷剂联合Cyclopamine对PC-3细胞生长的影响,电镜观察低剂量砷剂（6μmol/L）和Cyclopamine（2μmol/L）对PC-3细胞形态和超微结构的影响,以流式细胞仪检测细胞凋亡,TRAP-ELISA检测端粒酶活性,BrdU掺入方法检测低剂量砷剂和Cyclopamine对PC-3细胞DNA合成的影响, RT-PCR法检测GLI1的表达。实验结果显示:低剂量砷剂联合Cyclopamine可以明显抑制PC-3细胞的增殖,作用48h可见细胞凋亡;流式细胞图发现经6μmol/L的As2O3和2μmol/L的Cyclopamine共同作用48h后,在流式图上可见到代表凋亡的亚G1峰,联合用药组的细胞凋亡率明显高于6μmol/L的As2O3组和2μmol/L的Cyclopamine组（P<0.01）,其凋亡率与高浓度As2O3组（18μmol/L）的凋亡率无显着性差别（P>0.05）,高于4μmol/L的Cyclopamine组（P<0.05）;PC-3细胞对照组BrdU掺入阳性细胞平均约占细胞总数的79%±2.33,低剂量砷剂和Cyclopamine联合用药组作用PC-3细胞48h后,BrdU掺入阳性细胞数平均约占细胞总数的26%±3.82,与单药作用组分别作用有显着性差异（P<0.01）,与4μmol/L的Cyclopamine作用组及18μmol/L的As2O3作用组相比则无显着性差异（P>0.05）;6μmol/L的As2O3作用PC-3细胞48h后可以抑制端粒酶的活性,吸光度A值为0.792±0.011,而联合用药组作用PC-3细胞48h后亦可抑制端粒酶的活性,吸光度A值为0.769±0.045,两组之间无显着性差异（P>0.05）;但与对照组相比（A值为0.892±0.021）均有显着性差异（P<0.05）;RT-PCR结果显示,在DNALadder约292bp处出现明暗相间的分子条带,即为目的基因GLI1;而在约579 bp处出现粗细、明暗均较均一的条带,此即内参GAPDH,说明PC-3细胞GLI1的表达较强,与2μmol/L的Cyclopamine共同作用48h后,GLI1的表达有所减弱,随着其浓度的增加,在4μmol/L组GLI1的表达进一步减弱,与对照组相比均有显着性差异（P<0.05）;而联合用药组尽管对GLI1的表达也有抑制,与对照组相比有显着性差异（P<0.05）,但与2μmol/L的Cyclopamine单独用药组相比,抑制作用无增强或减弱,统计学分析无显着性差异（P>0.05）,进一步的研究发现,无论是低剂量砷剂还是高剂量砷剂,其对GLI1的表达均无影响。结论:一.As2O3可明显抑制前列腺癌非雄依赖的PC-3细胞的增殖,其途径可能与以下两方面机制有关,一是诱导细胞凋亡,抑制细胞周期,二是下调细胞的端粒酶活性,但对Hh信号通路的关键因子GLI1的活性无影响。二.As2O3对前列腺癌非雄依赖的DU-145细胞系也有明显的抑制作用,且随着药物浓度增加和作用时间延长,凋亡细胞明显增加,出现G2/M期阻滞和DNA的断裂。三.Cyclopamine可以通过抑制Hh信号转导通路而明显抑制PC-3细胞的增殖和DNA的合成,降低GLI1的表达,抑制细胞的周期,诱导细胞的凋亡,但对细胞端粒酶活性无抑制作用。四.低剂量砷剂（6μmol/L）和Cyclopamine（2μmol/L）的联合应用可以抑制PC-3细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,细胞凋亡率明显高于6μmol/L的As2O3组和2μmol/L的Cyclopamine组,与高浓度As2O3组（ 18μmol/L ）的凋亡率无显着性差别,但明显高于4μmol/L的Cyclopamine组;其对端粒酶的活性和GLI1的表达均有抑制作用,但与单药作用组相比无显着性差异,二者的联合应用,有协同作用,可以通过降低药物剂量,降低潜在的可能的毒副作用,并取得同样甚至优于高剂量单药作用同样的抑制PC-3细胞的效果。
二、三氧化二砷对NB4细胞珠端粒酶活性的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、三氧化二砷对NB4细胞珠端粒酶活性的影响（论文提纲范文）
（1）三氧化二砷联合双氢青蒿素抗急性单核细胞白血病的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语名词对照表 |
| 文献综述 |
| 1. 急性单核细胞白血病概述 |
| 2. 三氧化二砷抗白血病的机制研究 |
| 3. 双氢青蒿素抗白血病的机制研究 |
| 前言 |
| 第一部分 三氧化二砷联合双氢青蒿素对急性单核细胞白血病的体外研究 |
| 1. 三氧化二砷联合双氢青蒿素对急性单核细胞白血病细胞THP-1细胞的研究 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 细胞 |
| 1.1.2 药物与试剂 |
| 1.1.3 仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 细胞培养 |
| 1.2.2 药物的配制 |
| 1.2.3 MTT法检测三氧化二砷对THP-1细胞生长的影响 |
| 1.2.4 MTT法检测双氢青蒿素对THP-1细胞生长的影响 |
| 1.2.5 MTT法检测三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞生长的影响 |
| 1.2.6 PI单染法分析三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞周期分布的影响 |
| 1.2.7 Annexin V-FITC/ PI双染法分析三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞凋亡的影响 |
| 1.2.8 Western blotting测定三氧化二砷联合双氢青蒿素对相关凋亡蛋白表达的影响 |
| 1.3 结果 |
| 1.3.1 三氧化二砷对THP-1细胞生长的影响 |
| 1.3.2 双氢青蒿素对THP-1细胞生长的影响 |
| 1.3.3 三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞生长的影响 |
| 1.3.4 三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞周期分布的影响 |
| 1.3.5 三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞凋亡的影响 |
| 1.3.6 三氧化二砷联合双氢青蒿素对相关凋亡蛋白表达的影响 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 结论 |
| 2. 三氧化二砷联合双氢青蒿素对急性单核细胞白血病细胞SHI-1细胞的研究 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 细胞 |
| 2.1.2 药品与试剂 |
| 2.1.3 仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 细胞培养 |
| 2.2.2 MTT法检测三氧化二砷对SHI-1细胞生长的影响 |
| 2.2.3 MTT法检测双氢青蒿素对SHI-1细胞生长的影响 |
| 2.2.4 MTT法检测三氧化二砷联合双氢青蒿素对SHI-1细胞生长的影响 |
| 2.2.5 Annexin V-FITC/ PI双染法分析三氧化二砷对SHI-1细胞凋亡的影响 |
| 2.2.6 Annexin V-FITC/ PI双染法分析双氢青蒿素对SHI-1细胞凋亡的影响 |
| 2.2.7 Annexin V-FITC/ PI双染法分析三氧化二砷联合双氢青蒿素对SHI-1细胞凋亡的影响 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 三氧化二砷对SHI-1细胞生长的影响 |
| 2.3.2 双氢青蒿素对SHI-1细胞生长的影响 |
| 2.3.3 三氧化二砷联合双氢青蒿素对SHI-1细胞生长的影响 |
| 2.2.4 三氧化二砷对SHI-1细胞凋亡的影响 |
| 2.2.5 双氢青蒿素对SHI-1细胞凋亡的影响 |
| 2.2.6 三氧化二砷联合双氢青蒿素对SHI-1细胞凋亡的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 结论 |
| 第二部分 三氧化二砷联合双氢青蒿素对急性单核细胞白血病的体内研究 |
| 1. 急性单核细胞白血病模型的建立 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 动物 |
| 1.1.2 细胞 |
| 1.1.3 试剂 |
| 1.1.4 仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 细胞培养 |
| 1.2.2 动物分组 |
| 1.2.3 接种 |
| 1.2.4 移植接种 |
| 1.3 结果 |
| 1.3.1 接种结果 |
| 1.3.2 移植接种结果 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 结论 |
| 2. 三氧化二砷联合双氢青蒿素对急性单核细胞白血病SHI-1细胞模型的治疗作用研究 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 动物 |
| 2.1.2 细胞 |
| 2.1.3 试剂 |
| 2.1.4 仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 药物配制 |
| 2.2.2 细胞培养 |
| 2.2.3 建立模型 |
| 2.2.4 动物分组 |
| 2.2.5 给药及肿瘤测量 |
| 2.2.6 病理检查 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 肿瘤体积变化 |
| 2.3.2 肿瘤重量比较 |
| 2.3.3 病理检查结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 结论 |
| 结论 |
| 硕士期间发表的论文 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
（2）青蒿琥酯联合三氧化二砷诱导NB4细胞凋亡的线粒体通路的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语名词对照表 |
| 文献综述 |
| 1 急性早幼粒细胞白血病(APL)概述及治疗情况 |
| 2 三氧化二砷与白血病的治疗 |
| 3 青蒿琥酯抗肿瘤的药理作用研究 |
| 前言 |
| 实验材料 |
| 1 细胞株 |
| 2 药物与试剂 |
| 3 仪器与设备 |
| 实验方法 |
| 1 细胞培养 |
| 2 受试药物的配制 |
| 3 MTT法测定ART对NB4细胞活力的影响 |
| 4 MTT法检测ATO对NB4细胞活力的影响 |
| 5 MTT法检测联合用药对NB4细胞活力的影响 |
| 6 流式细胞术检测细胞周期分布 |
| 7 Annexin V-FITC/PI双染法分析细胞凋亡 |
| 8 JC-1法检测线粒体膜电位(MMP)变化 |
| 9 MitoSOX法测定线粒体内活性氧物质(ROS)含量 |
| 10 qRT-PCR测定有关mRNA转录 |
| 11 Western blotting测定蛋白表达 |
| 12 统计分析 |
| 实验结果 |
| 1 ART对NB4细胞活力的影响 |
| 2 ATO对NB4细胞活力的影响 |
| 3 联合用药对NB4细胞活力的影响 |
| 4 药物对细胞周期的影响 |
| 5 药物对细胞凋亡的影响 |
| 6 药物对细胞线粒体膜电位(MMP)的影响 |
| 7 药物对细胞线粒体内活性氧物质(ROS)的影响 |
| 8 青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用对相关mRNA转录的影响 |
| 9 青蒿琥酯与三氧化二砷联合应用对相关蛋白表达的影响 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士期间发表的论文 |
| 致谢 |
（3）急性早幼粒细胞白血病凝血纤溶异常的研究（论文提纲范文）
| 第一部分 临床研究 初诊急性早幼粒细胞白血病患者早期凝血纤溶指标的检测与分析 |
| 摘要 |
| Abstract |
| (一)前言 |
| (二)材料和方法 |
| (三)结果 |
| (四)讨论 |
| (五)参考文献 |
| 第二部分 基础研究 三氧化二砷(ATO)对急性早幼粒细胞白血病细胞株(NB4)与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养体系纤溶活性的影响 |
| 摘要 |
| Abstract |
| (一)前言 |
| (二)材料 |
| (三)结果 |
| (四)讨论 |
| (五)参考文献 |
| 结论 |
| 综述 急性早幼粒细胞白血病的凝血功能障碍 |
| 参考文献 |
| 附录 中英文缩略词表 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
（4）原发性肝癌“毒瘀互结”的病机理论及丹参酮胶囊联合三氧化二砷干预机制的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分: 理论研究 |
| 一、病名溯源 |
| (一) 伏梁 |
| (二) 症积 |
| (三) 黄疸 |
| (四) 鼓胀 |
| (五) 胁痛 |
| 二、对原发性肝癌病因病机的认识 |
| (一) 病因的认识 |
| 1. 外邪因素 |
| 2. 饮食因素 |
| 3. 情志因素 |
| 4. 劳倦内伤 |
| (二) 原发性肝癌病机特点 |
| 1. 癌毒是肝癌发生发展的启动因素 |
| 2. 血瘀阻滞脉络是肝癌发生发展的基本病理机制 |
| 3. 正气不足是肝癌发病的内在条件 |
| 三、以毒攻毒、化瘀扶正是治疗原发性肝癌的基本治则 |
| 四、选药依据 |
| 参考文献 |
| 第二部分: 实验研究 |
| (一) 实验一: 丹参酮胶囊联合ATO对肝癌bel-7404细胞增殖与凋亡的影响 |
| 1. 实验材料与方方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 分析与讨论 |
| 4. 小结 |
| 5. 参考文献 |
| 6. 附图 |
| (二)实验二: 丹参酮胶囊联合ATO对bel-7404细胞凋亡蛋白表达的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 分析与讨论 |
| 4. 小结 |
| 5. 参考文献 |
| (三)实验三: 丹参酮胶囊联合ATO对bel-7404细胞MAPK信号转导通路的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 分析与讨论 |
| 4. 小结 |
| 5. 参考文献 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 附：文献综述 |
| 参考文献 |
（5）丹参酮ⅡA对ATO抗人急性早幼粒细胞白血病的化疗增敏作用及其机制的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词索引表 |
| 前言 |
| 第一部分 细胞自噬、凋亡在丹参酮ⅡA联合ATO抗 人急性早幼粒细胞白血病化疗增敏机制中的作用 |
| 材料及方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 丹参酮ⅡA联合ATO对 NB4 细胞中PI3K-I/AKT/MTOR和BCL-2家族蛋白信号通路的影响 |
| 材料及方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第三章 丹参酮ⅡA联合ATO治疗人急性早幼粒细胞白血病荷瘤裸鼠模型的体内实验研究 |
| 材料及方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 论文创新点 |
| 参考文献 |
| 综述 细胞自噬分子机制及自噬与肿瘤关系的研究进展 |
| 参考文献 |
| 在校期间发表的论文 |
| 致谢 |
（6）三氧化二砷纳米粒对NB4细胞PTEN蛋白和线粒体凋亡途径的影响（论文提纲范文）
| 前言 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词 |
| 第1章 绪论 |
| 第2章 文献综述 |
| 2.1 As_2O_3对肿瘤细胞的作用 |
| 2.1.1 治疗血液系统肿瘤 |
| 2.1.2 治疗实体肿瘤 |
| 2.1.3 与抗肿瘤药物联合 |
| 2.2 As_2O_3治疗恶性肿瘤的作用机制 |
| 2.2.1 直接作用 PML-RARα融合蛋白 |
| 2.2.2 诱导细胞凋亡 |
| 2.2.3 诱导肿瘤细胞分化 |
| 2.2.4 抑制肿瘤细胞增殖 |
| 2.2.5 抑制肿瘤内血管生成的作用 |
| 2.2.6 下调端粒酶活性 |
| 2.2.7 对细胞信号传导的影响 |
| 2.3 As_2O_3的新剂型 |
| 2.4 As_2O_3的毒副作用 |
| 2.5 问题和展望 |
| 第3章 实验研究 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 细胞 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 主要试剂配制 |
| 3.1.4 主要仪器 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 As_2O_3纳米粒的制备 |
| 3.2.2 白血病细胞的培养 |
| 3.2.3 As_2O_3纳米粒对 NB4 细胞的增殖抑制作用 |
| 3.2.4 As_2O_3纳米粒对 NB4 细胞的诱导凋亡作用 |
| 3.2.5 流式细胞术检测 As_2O_3纳米粒对 NB4 细胞的凋亡率 |
| 3.2.6 罗丹明 123 染色检测 NB4 细胞线粒体膜电位（MMP）变化 |
| 3.2.7 As_2O_3纳米粒对 NB4 细胞 PTEN、AKT、Bax、caspase-3、caspase-9 和 AIF 蛋白的影响 |
| 3.2.8 统计分析 |
| 第4章 结果 |
| 4.1 As_2O_3纳米粒对 NB4 细胞的增殖抑制作用 |
| 4.2 As_2O_3纳米粒对 NB4 细胞的诱导凋亡作用 |
| 4.3 流式细胞术检测 As_2O_3纳米粒对 NB4 细胞的凋亡率 |
| 4.4 罗丹明 123 检测 NB4 细胞线粒体膜电位变化 |
| 4.5 Western blot 法检测 PTEN、AKT 和 Bax 蛋白水平变化 |
| 4.6 Western blot 法检测 caspase-3、caspase-9 和 AIF 蛋白水平变化 |
| 第5章 讨论 |
| 第6章 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（7）川芎嗪对NB4细胞端粒酶活性的影响及其抗肿瘤分子机制的研究（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的论文 |
（8）对比硫化砷对两种白血病细胞株凋亡和hTERT-mRNA表达的影响（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 试剂配置和细胞培养 |
| 1.2.2 流式细胞仪分析细胞周期 |
| 1.2.3 端粒酶活性检测 |
| 1.2.4 细胞凋亡检测 |
| 1.2.5 RT-PCR检测hTER mRNA的表达 |
| 1.2.6 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 硫化砷对NB4和K562细胞周期的影响 |
| 2.2 硫化砷对NB4和K562细胞凋亡的影响 |
| 2.3 硫化砷对NB4和K562细胞端粒酶活性的影响 |
| 2.4 硫化砷对NB4和K562细胞hTERT-mRNA表达的影响 |
| 3 讨论 |
（9）丹参酮与三氧化二砷协同诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株分化与凋亡的体外研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 个人简历 |
（10）低剂量砷剂联合Cyclopamine对前列腺癌细胞株PC-3生长影响机制的初步研究（论文提纲范文）
| 一、正文 |
| （一） 中文摘要 |
| （二） 英文摘要 |
| （三） 前言 |
| （四） 第一部分三氧化二砷对前列腺癌PC-3 细胞系细胞周期及端粒酶活性的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| （五） 第二部分三氧化二砷对前列腺癌DU-145 细胞周期阻滞及凋亡的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| （六） 第三部分Cyclopamine 对非雄依赖的前列腺癌PC-3 细胞的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| （七） 第四部分低剂量砷剂联合Cyclopamine 对前列腺癌细胞株PC-3 生长影响的研究 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 二、文献综述 |
| （一） 综述一 |
| （二） 参考文献 |
| （三） 综述二 |
| （四） 参考文献 |
| 三、致谢 |
| 四、作者简介 |
| 五、博士期间发表论文及科研情况 |
| 六、缩略词表 |
四、三氧化二砷对NB4细胞珠端粒酶活性的影响（论文参考文献）
- [1]三氧化二砷联合双氢青蒿素抗急性单核细胞白血病的实验研究[D]. 赵丽凤. 中国中医科学院, 2020(01)
- [2]青蒿琥酯联合三氧化二砷诱导NB4细胞凋亡的线粒体通路的研究[D]. 尹婷. 中国中医科学院, 2019(12)
- [3]急性早幼粒细胞白血病凝血纤溶异常的研究[D]. 宋玉华. 南京医科大学, 2018(06)
- [4]原发性肝癌“毒瘀互结”的病机理论及丹参酮胶囊联合三氧化二砷干预机制的研究[D]. 常虹. 浙江中医药大学, 2015(01)
- [5]丹参酮ⅡA对ATO抗人急性早幼粒细胞白血病的化疗增敏作用及其机制的实验研究[D]. 王叨. 郑州大学, 2015(12)
- [6]三氧化二砷纳米粒对NB4细胞PTEN蛋白和线粒体凋亡途径的影响[D]. 董怡. 吉林大学, 2014(10)
- [7]川芎嗪对NB4细胞端粒酶活性的影响及其抗肿瘤分子机制的研究[D]. 王翠翠. 重庆医科大学, 2012(01)
- [8]对比硫化砷对两种白血病细胞株凋亡和hTERT-mRNA表达的影响[J]. 李静,曹云新,郝锦霞,刘陕西. 细胞与分子免疫学杂志, 2009(10)
- [9]丹参酮与三氧化二砷协同诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株分化与凋亡的体外研究[D]. 马云. 宁夏医科大学, 2009(S2)
- [10]低剂量砷剂联合Cyclopamine对前列腺癌细胞株PC-3生长影响机制的初步研究[D]. 刘志宇. 大连医科大学, 2008(02)