一、皮肤鳞癌中p63表达和巨噬细胞反应的研究（论文文献综述）
张雪丽[1]（2021）在《RNA干扰RPL34基因敲低对人皮肤鳞癌SCL-1细胞的影响实验研究》文中研究表明
陈航琦[2]（2021）在《miRNA-106a在头颈鳞癌中的表达及其临床意义》文中指出目的:本课题通过对miRNA-106a在头颈鳞癌组织及癌旁组织中的表达进行研究,分析研究miRNA-106a能否作为头颈鳞癌的肿瘤筛查指标,并通过探讨miRNA-106a与头颈鳞癌患者临床病理特征以及生存预后的相关性,探究miRNA-106a与头颈鳞癌的发生发展的关系,以期为头颈鳞癌的诊断及预后评估提供理论依据。方法:收集2020年4月至2020年12月就诊于我院耳鼻咽喉头颈外科并接受手术治疗的32例原发性头颈鳞癌患者的癌组织及癌旁组织标本,通过实时荧光定量PCR技术检测样本中miRNA-106a的表达水平,并比较癌组织及癌旁组织中miRNA-106a的表达差异以及与临床病理特征之间的相关性;应用受试者工作曲线（ROC曲线）判断miRNA-106a在头颈鳞癌诊断中的灵敏度及特异度;通过癌症基因组图谱（the cancer genome atlas,TCGA）数据库获取头颈鳞癌患者的miRNA-106a测序结果、临床特征及病理资料、生存状态等,选取符合纳入标准的样本,并分析头颈鳞癌样本与正常样本中miRNA-106a表达差异与各临床及病理特征之间的相关性。Kaplan-Meier方法计算生存分析。结果:miRNA-106a在头颈鳞癌组织中表达高于癌旁组织。相关分析提示miRNA-106a的表达与头颈鳞癌患者的病理分期、浸润深度T分期有关（P<0.05）,差异具有统计学意义,与患者的性别、年龄、淋巴结转移、发生部位均无关（P>0.05）;受试者工作曲线（ROC曲线）判断miRNA-106a诊断HNSCC的曲线下面积为0.734（95%CI:0.555-0.913）,以1.35为界值,miRNA-106a诊断HNSCC的敏感度和特异度分别为75%和75%,约登指数为0.5。在TCGA数据库中对miRNA-106a在头颈鳞癌的表达情况进行检索,共纳入525例HNSCC患者的525个癌组织和44个癌旁组织样本,其中临床特征信息完整的样本共370例,癌组织中miRNA-106a表达水平明显高于癌旁组织（P<0.05）,差异具有统计学意义。miRNA-106a在癌组织及癌旁组织中表达水平以中位数（3.26）为界分为低表达组和高表达组,并用χ2检验HNSCC样本中miRNA-106a表达水平与临床特征之间的相关性,发现miRNA-106a表达水平与浸润分期、年龄相关（P<0.05）,差异具有统计学意义,而与性别、病理分期、淋巴结转移无关（P>0.05）。Kalan-Meier生存曲线和Log-rank检验分析结果显示,miRNA-106a高表达患者的生存率好于miRNA-106a低表达患者（P<0.05）,差异具有统计学意义。结论:1.miRNA-106a在HNSCC患者癌组织中表达水平高于癌旁组织且其表达水平与病理分期、肿瘤浸润分期有关。与HNSCC患者的性别、年龄、淋巴结转移、发生部位等临床病理特征无关。2.ROC曲线提示miRNA-106a对诊断HNSCC的特灵敏度和特异度均较高。3.TCGA数据库中miRNA-106a在HNSCC患者癌组织样本中表达水平高于正常组织样本,且表达量与肿瘤浸润分期有关。4.基于TCGA数据库中样本信息分析,Kalan-Meier生存曲线显示miRNA-106a高表达患者的生存率高于miRNA-106a低表达患者。
孙涛[3]（2021）在《肾透明细胞癌中Claudin-8的表达及其意义》文中研究表明
王春秀[4]（2021）在《血浆SHOX2和RASSF1A甲基化表达情况与恶性肺结节的关系》文中研究说明
杨翠林,自宝莉,李萍,周开华[5]（2021）在《肺腺癌免疫组化标记物的临床应用及其与基因突变关系的研究进展》文中研究表明肺癌是最常见诊断和导致死亡的恶性肿瘤之一[1]。非小细胞肺癌（non-small cell lung carcinoma,NSCLC）约占所有肺癌的80%～85%,腺癌（约占40%～50%）和鳞癌（约占20%～30%）是非小细胞肺癌的主要亚型[2-3]。在以前由于治疗的局限性,通常不需要对非小细胞肺癌进一步分类,因此在小样本中很少区分腺癌和鳞癌,随着靶向治疗和免疫治疗的发展,不仅改变了治疗策略,而且强调将NSCLC进一步分类为特定亚型的重要性[4-5]。
李佳伦[6]（2021）在《YBX3对舌鳞癌细胞生长行为的影响及其分子机制的研究》文中指出研究背景:舌鳞状细胞癌（简称舌鳞癌）是目前发病率最高的口腔恶性肿瘤,区域淋巴结转移及复发率较高,其发生和发展的具体机制尚不明确。研究证实YBX3在多种类别的癌症中起着至关重要的作用,能影响肿瘤增殖、侵袭与迁移等生物学行为。迄今为止尚未有关于YBX3在舌鳞癌中的研究。研究目的:研究YBX3在舌鳞癌组织中的表达情况,和其对舌鳞癌细胞生长行为的影响及分子机制。研究方法:临床收集35例舌鳞癌组织样本及2例正常舌鳞状上皮组织样本,使用免疫组织化学染色的方法分析组织中YBX3的表达情况。体外培养人舌鳞癌细胞系CAL27及Tca-8113,利用siRNA技术敲低细胞中YBX3的表达,使用q RT-PCR和Western Blot方法检测敲低效率。YBX3敲低后,通过Ed U实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,CYTO-ID染色共聚焦显微镜观察细胞自噬,并使用Western Blot方法检测增殖、周期和自噬相关因子的表达情况及信号通路相关蛋白的改变。研究结果:免疫组化结果表明,在舌鳞癌样本中YBX3均呈阳性表达,且表达的强弱与肿瘤的分化程度呈负相关性,即高分化的舌鳞癌中YBX3表达较弱,中低分化时YBX3表达较强;同时YBX3的表达与患者的年龄呈正相关,即小于60岁的样本中YBX3表达较弱,大于或等于60岁的样本中YBX3表达较强。体外实验表明,下调YBX3能抑制细胞增殖,引起细胞周期停滞,并激活自噬。并且YBX3降表达后,Wnt/β-Catenin和m TOR信号通路受到抑制。研究结论:YBX3在舌鳞状细胞癌样本中呈阳性表达,且其表达强弱与分化程度及年龄相关。在舌鳞癌细胞中YBX3的降表达能通过Wnt/β-Catenin和m TOR信号通路抑制细胞生长并诱导自噬。
张青玲[7]（2020）在《NQO1基因及阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌增殖、凋亡、侵袭迁移的影响及机制研究》文中提出研究背景:皮肤鳞状细胞癌（CSCC）是常见的皮肤恶性肿瘤之一,发病率高,具有一定的侵袭及转移能力,严重影响患者生活质量。常见发病危险因素为紫外线（UV）辐射、病毒感染、机体免疫状态等。目前治疗方法有手术切除、激光和冷冻治疗、放射治疗及药物治疗等,但部分患者疗效欠佳。NAD（P）H脱氢酶1（NQO1）是一种器官中广泛分布的黄素酶,以NAD（P）H为供体,催化醌类化合物的双电子还原为对苯二酚类化合物。据报道,NQO1基因缺失,易使小鼠受到氧化应激的影响,发展为肿瘤。也有报道称NQO1敲除可减少胶质母细胞瘤细胞的增殖,而过度表达则增加细胞增殖。基于上述不同的观点,NQO1被认为同时具有抗癌和致癌作用,这取决于不同的条件和细胞种类。由于皮肤鳞状细胞癌的发生发展与紫外线诱导的氧化应激密切相关,我们推测NQO1可能在鳞状细胞癌中起作用。阿苯达唑是一种驱虫药,但近期研究表明阿苯达唑具有抗肿瘤（如非小细胞肺癌、转移性黑色素瘤等）活性,但阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌细胞的作用及其作用机制的影响尚不清楚。因此,本文拟对NQO1基因及阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌增殖、凋亡、侵袭迁移的影响及机制进行研究,进一步揭示皮肤鳞状细胞癌的发生机制,为阿苯达唑临床应用奠定理论基础。第一部分NQO1对皮肤鳞状细胞癌增殖侵袭转移的影响及机制研究目的:检测NQO1基因对皮肤鳞状细胞癌增殖、侵袭迁移的影响,并探讨其机制,为研究鳞癌的发病机制和寻求有效诊断治疗靶点提供新的思路。方法:1.NQO1表达水平检测收集皮肤鳞状细胞癌患者肿瘤组织及肿瘤周围正常组织,进行免疫组化染色,评估鳞癌组织及正常皮肤组织中NQO1表达水平;用western blot方法检测人皮肤细胞如表皮角质形成细胞、人皮肤成纤维细胞以及鳞癌细胞SCC12和SCC13中NQO1蛋白表达水平。2.重组腺病毒的构建通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）等获得NQO1基因过表达或敲除的重组腺病毒。3.NQO1过表达或敲除对皮肤鳞癌细胞生物学行为的影响细胞生长实验用于评估NQO1对CSCC增殖的影响;平板克隆形成实验用于评估NQO1以及阿苯达唑对CSCC细胞平板克隆形成能力的影响;细胞侵袭实验和Wound-healing细胞划痕实验检测对CSCC细胞迁移侵袭能力的影响;4.机制研究western blot方法检测NQO1过表达或敲除对细胞增殖相关调节蛋白如Cyclin D1、Cyclin E、SOX2等表达影响,对E-cadherin、snail等EMT相关分子标志影响,以及EMT相关信号通路标志性分子如AKT、JNK和p38 MAPK等的磷酸化水平的影响,从而揭示NQO1对CSCC增殖、侵袭迁移影响的机制:用深红色染料检测细胞内ROS水平,用于评估NQO1对细胞内ROS水平的影响。结果:1.NQO1在皮肤鳞状细胞癌中的表达NQO1在CSCC损伤区几乎没有检测到或部分检测到。在CSCC病变周围的免疫细胞中可观察到NQO1免疫反应性。与角质形成细胞和成纤维细胞相比,皮肤鳞状细胞癌细胞（SCC12和SCC13）和皮肤细胞中NQO1蛋白水平略低。2.NQO1过表达或敲除对皮肤鳞癌细胞生物学行为的影响细胞生长实验:NQO1过表达导致CSCC细胞系（SCC12和SCC13细胞）细胞增殖显着降低,而NQO1敲除则增加了细胞增殖;与细胞增殖实验结果相似,NQO1降低了SCC12和SCC13细胞的克隆形成活性;细胞侵袭实验:NQO1过表达显着降低了SCC细胞侵袭能力,而NQO1敲除增加了CSCC细胞侵袭;Woundhealing细胞划痕实验:NQO1过表达减少细胞迁移,而NQO1敲除增加细胞迁移。3.NQO1对CSCC细胞增殖相关调节因子的影响NQO1过表达显着降低了细胞增殖相关调节因子如Cyclin D1、Cyclin E等的水平,NQO1敲除增加了这些细胞增殖相关调节因子的水平。4.NQO1对上皮-间质转化（EMT）相关分子标记的影响NQO1过表达使CSCC细胞E-cadherin水平升高,N-cadherin、Vimentin、Snail、Slug水平略有下降,而NQO1敲除略微降低了CSCC细胞E-cadherin的水平,而增加了其他分子的水平。5.NQO1对上皮-间质转化（EMT）相关细胞内信号通路的影响NQO1过表达轻微地降低了CSCC细胞磷酸化AKT、JNK和p38MAPK的水平,而NQO1敲除则增加了磷酸化AKT、JNK和p38MAPK的水平。6.NQO1对CSCC细胞内ROS水平的影响NQO1过表达明显降低了CSCC细胞内ROS水平,NQO1的敲除导致了CSCC细胞内ROS水平显着升高。结论:NQO1可抑制CSCC增殖、侵袭迁移;NQO1抑制皮肤鳞状细胞癌细胞增殖可能与调节增殖相关调节蛋白如细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、细胞周期蛋白E（CyclinE）及p63等水平有关;NQO1可抑制CSCC细胞的侵袭迁移,其机制可能与调控E-cadherin、N-cadherin、波形蛋白（Vimentin）、Snail、slug等上皮间质转化（EMT）相关分子标记的表达水平有关;NQO1对皮肤鳞状细胞癌上皮-间质转化（EMT）的影响与降低EMT相关细胞内信号通路中AKT、JNK和p38mapk等的磷酸化水平有关;NQO1可降低CSCC细胞内ROS的水平。第二部分阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌的抗肿瘤作用及机制研究目的:研究阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌的抗肿瘤作用及机制。方法:1.通过MTT实验评估阿苯达唑对CSCC细胞的细胞毒性及凋亡的影响。2.通过TUNEL染色及Western blot检测阿苯达唑对CSCC细胞凋亡的影响。3.机制研究通过TOPflash实验检测阿苯达唑对CSCC细胞Wnt/β-catenin信号通路活性的影响;Westernblot及MTT实验检测阿苯达唑对内质网应激的影响;平板克隆形成实验、MTT实验及Western blot方法检测阿苯达唑对CSCC干细胞特性的影响。结果:1.阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌细胞凋亡的影响MTT实验显示,在阿苯达唑浓度大于等于0.2μm时可降低SCC12和SCC13细胞的生存能力;Tunel检测显示,与DMSO处理对照组相比,阿苯达唑处理组超过浓度大于等于0.5μm时凋亡细胞明显增加;Western blot示阿苯达唑诱导CSCC细胞凋亡且呈剂量依赖性。2.阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌的特异性作用使用正常的人表皮角质形成细胞进行对比试验显示,阿苯达唑剂量超过0.2μM时可诱导SCC13细胞凋亡,而在阿苯达唑剂量超过1.0μM仍未能诱导人表皮角质形成细胞凋亡。3.阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌细胞内质网应激的影响阿苯达唑增加了SCC12和SCC13细胞内质网应激诱导凋亡相关信号分子半胱天冬酶-4和半胱天冬酶-12水平。内质网应激抑制剂4-PBA预处理抑制了阿苯达唑诱导的CHOP和半胱天冬酶-12的活化。4.阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌细胞干细胞特性的影响阿苯达唑在无毒剂量0.05μM和0.1μM时能显着降低SCC12和SCC13细胞的克隆形成能力,导致TOPflash活性降低;这些数据一致,Western blot显示阿苯达唑处理使Wnt/β-连环蛋白明显减少。结论:阿苯达唑可诱导皮肤鳞状细胞癌细胞的凋亡;阿苯达唑诱导CSCC细胞凋亡具有特异性;阿苯达唑诱导CSCC细胞内质网应激;阿苯达唑能作用于Wnt/β-连环蛋白信号通路,降低CSCC的干细胞特性。
乔丽丽[8]（2020）在《Notch信号的关键靶标PLEC在调节鳞状上皮稳态和参与食管鳞癌致癌机理中的研究》文中认为食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）是常见的消化系统恶性肿瘤,其恶性程度高,预后较差。ESCC的发生是环境因素和遗传因素共同作用的结果。环境因素主要包括化学致癌物暴露、吸烟、饮酒等。在遗传方面,多项高通量全基因组或外显子测序揭示了多个ESCC中重要改变的基因,如TP53、Notch1、CDKN2A、PIK3CA等,这些基因涉及了多种驱动过程如基因组不稳定性、分化、增殖、细胞周期、表观遗传学改变等,其中分化发挥着非常重要的作用,但是其分子机制还不完全清楚。Notch信号是调节鳞状上皮分化的关键通路之一,其中Notch1起主导作用。Notch1还参与多种分化相关骨架蛋白以及细胞形态的调节。在鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma,SCC）中,Notch 信号发挥了双刃剑作用,一方面 Notch作为抑癌基因发挥作用,另一方面,Notch信号还会被激活,促进SCC的进展。Plectin（PLEC）是一种细胞骨架交联蛋白,其与三种主要的胞浆骨架系统包括中间纤维、微管和肌动蛋白相互作用,参与细胞形态及机械动力学调节。有研究发现,PLEC突变与恶性肿瘤的发生有关。然而,PLEC在ESCC中的作用尚不清楚,它作为一种重要的骨架交联蛋白,与鳞状上皮分化稳态和Notch之间的关系尚未明确。本研究中,通过生物信息学分析发现PLEC在人ESCC组织中频繁突变,可能与Notch信号有关。随后,通过体外钙离子诱导分化模型确认PLEC是Notch信号的一个下游靶标,参与了食管鳞状上皮的分化稳态。在分化上皮中,plectin呈明显胞膜和少量胞浆定位,通过与细胞角蛋白及desmoplakin相互作用来维持上皮细胞的形态和功能。通过慢病毒shRNAs敲降PLEC会引起细胞形态变化,损害上皮稳态。此外,通过对大鼠食管上皮细胞进行三维类器官培养,发现PLEC缺失还会显着抑制类器官的形成,从而进一步说明了 PLEC在正常上皮中的重要性。接下来,本研究探索了 PLEC在ESCC发生发展中的作用。首先,通过qRT-PCR和组织芯片-免疫组织化学的方法揭示PLEC在ESCC组织中存在不同的表达模式,并且其表达与Notch1的表达呈正相关。其次,通过功能性实验证实,在ESCC中,PLEC发挥了抑癌或促癌的双重作用,这种差异性作用与PLEC的基因背景、定位以及肿瘤的分化有关。在Notch或PLEC突变的ESCC巾,PLEC功能异常或表达下降会促进肿瘤发生;而在PLEC野生型、分化良好的ESCC中,PLEC表达主要参与分化、抑制肿瘤发生,但对于PLEC野生型、分化差的ESCC,PLEC的高表达发挥了促癌作用。综上所述,PLEC作为Notch信号的一个关键靶基因,参与了食管上皮分化稳态的维持,并在ESCC发生和发展中发挥着重要作用,本研究将为ESCC发病机制的完善和治疗靶标的探寻提供新的指导和方向。
李辉[9]（2018）在《非小细胞肺癌中miR-944的功能、诊断意义及与Host gene p63表达相关性的研究》文中认为肺癌是世界范围内最高发的恶性肿瘤之一,深入探讨其发病机制、准确鉴别肺鳞癌与腺癌,对于非小细胞肺癌（Non-Small-Cell lung cancer,NSCLC）患者的诊断和治疗意义重大。MicroRNA（miRNA）是一种精细调节基因表达的内源性分子,不仅可作为癌基因或抑癌基因参与肿瘤的形成与进展过程,而且其检测被认为是辅助肿瘤诊断、预后判断以及疗效评价等方面重要的生物标记,可见miRNA调控是一种重要的肿瘤相关分子机制。我们前期利用深度测序技术对肺鳞癌与腺癌组织中差异表达的miRNAs进行筛选,发现miR-944在肺鳞癌中的表达显着高于正常肺组织以及腺癌组织。此外,miR-944定位于p63基因内含子区,为p63基因的内含子mi RNA（Intronic miRNAs）。但是,目前有关miR-944在NSCLC中的作用、与其Host gene p63表达的相关性、在肺鳞癌与腺癌鉴别诊断中的意义等问题尚不明确。本研究中我们针对上述问题展开研究,主要包括以下三方面内容:1.观察miR-944在非小细胞肺癌细胞中的作用;2.揭示mi R-944与其Host gene p63表达的相关性及可能机制;3.探讨miR-944在手术切除标本及支气管灌洗液标本肺鳞癌与腺癌诊断中的作用。研究结果可为肺鳞癌的病因及发病机制、肺鳞癌与腺癌的鉴别诊断提供理论依据。第一部分:miR-944在非小细胞肺癌细胞中生物学作用的体外实验研究目的:从细胞增殖、迁移、凋亡及细胞周期分布方面观察miR-944在NSCLC细胞的作用。方法:体外培养肺腺癌A549、肺鳞癌SK-MES-1、H1703和H520细胞、以及皮肤鳞癌A431细胞（典型鳞癌细胞对照）,分别转染miR-944mimics或inhibitors,采用Taqman microRNA assay方法检测转染效率;采用MTT及多功能实时细胞分析仪（Real-Time Cellular Analysis,RTCA）检测细胞增殖;采用细胞划痕实验、Transwell小室和RTCA检测细胞迁移能力;采用FCM方法检测细胞凋亡及细胞周期分布情况。每组实验重复三次。所有数据应用SPSS Statistics17.0统计软件进行分析,P<0.05为有显着差异。结果:1.过表达或敲低miR-944效率检测:miR-944 mimics分别转染A549、H1703、H520及A431细胞后,miR-944表达较对照组显着增加（P<0.05）。转染mi R-944 inhibitors后,SK-MES-1细胞中miR-944表达较对照组显着抑制（P<0.05）。2.miR-944对细胞增殖的影响:MTT检测结果表明,mi R-944 mimics转染后A431细胞在24h-96h增殖活性均明显高于对照组（P<0.05）;A549细胞在48h、72h和96h增殖活性明显高于对照组（P<0.05）;H1703细胞转染后在72h、96h增殖活性明显高于对照组（P<0.05）。RTCA检测结果与MTT方法基本一致,两种方法的应用保证实验结果的可重复性。此外,MTT以及RTCA检测结果表明,miR-944 inhibitors转染SK-MES-1细胞后48h和72h,细胞增殖活性均明显低于对照组（P<0.05）。3.miR-944对细胞凋亡的影响:A549细胞miR-944 mimics组细胞凋亡率为7.93%±0.89%,明显低于对照组（15.6%±0.93%,P<0.05）。A431细胞miR-944 mimics组细胞凋亡率明显低于对照组细胞（14.2%±1.02%V.S.9.3%±0.83%,P<0.05）。而在H1703和H520细胞中细胞凋亡无明显改变。此外,与对照组（14.3%±0.98%）相比,miR-944 inhibitors转染SK-MES-1细胞的凋亡率（7.9%±0.91%）明显增加（P<0.05）。4.miR-944对细胞迁移能力的影响细胞划痕实验结果表明,过表达miR-944后A549、H1703及A431细胞划痕的愈合面积明显高于对照组细胞（P<0.05）;Transwell小室实验表明,A549、H1703及A431细胞miR-944 mimics转染组穿过膜的细胞数目明显多于对照组（P<0.05）;RTCA检测同样证实,miR-944 mimics转染组A549、H1703及A431细胞穿过下室的细胞数明显高于对照组（P<0.05）,提示过表达miR-944可促进细胞迁移能力。此外,三种方法一致表明,miR-944 inhibitors转染组SK-MES-1细胞迁移能力显着低于对照组细胞（P<0.05）。5.miR-944对细胞周期分布的影响:FCM检测结果表明,过表达或敲低miR-944对细胞周期分布均无显着影响。小结:1.miR-944参与调控细胞的增殖过程。过表达miR-944可促进A549、H1703及A431细胞增殖,而敲低miR-944可抑制SK-MES-1细胞的增殖过程。2.miR-944参与调控细胞的迁移过程。过表达miR-944可促进A549、H1703及A431细胞迁移,而敲低miR-944表达可抑制SK-MES-1细胞的迁移能力。3.过表达或敲低miR-944可抑制或增加细胞凋亡,但是对细胞周期无明显影响。综合结果表明,miR-944发挥癌基因作用,参与NSCLC细胞的增殖、凋亡及细胞迁移等过程。第二部分:miR-944与Host gene p63在非小细胞肺癌中表达的相关性研究目的:观察miR-944与其Host gene p63表达间的调控作用,并就miR-944对p63基因表达的调控机制进行探讨。方法:体外培养NSCLC细胞及A431细胞;观察TGF-β处理诱导p63表达、或siRNA转染敲低p63表达对mi R-944表达的影响;采用Real-time PCR及Western Blot方法,检测过表达miR-944对p63表达的影响;siRNA转染敲低细胞中YAP1或TAZ表达对p63表达的影响;同时检测miR-944对YAP1或TAZ表达的影响;进一步收集术前未经放疗或化疗的原发NSCLC手术切除石蜡组织标本90例,采用免疫组化方法检测YAP1与p63蛋白表达,并结合miR-944表达分析三者表达的相关性。应用SPSS Statistics17.0软件进行统计分析,P<0.05为有显着差异。结果:1.p63对miR-944表达的调控作用:参照文献,给予A431细胞TGF-β处理20h,细胞中p63在mRNA和蛋白水平被显着诱导表达,同时miR-944表达伴随p63表达而增加（P<0.05）。进一步转染p63siRNA敲低A431、SK-MES-1细胞中p63表达后,miR-944表达亦显着降低（P<0.05）,结果提示p63可调控mi R-944表达。2.miR-944对其Host gene p63表达的影响:将miR-944 mimics分别转染A549、H520、A431细胞,过表达miR-944后可见上述3种细胞中p63在mRNA及蛋白水平均表现不同程度增高（P<0.05）。此外,转染mi R-944 inhibitors抑制SK-MES-1细胞中miR-944表达后,p63表达也显着降低（P<0.05）,提示miR-944可调控Host gene p63表达。3.YAP1/TAZ对细胞中p63表达的影响:分别将YAP1 siRNA、TAZ siRNA转染A549、H520、A431细胞,在YAP1和TAZ表达显着抑制的同时,三种细胞中p63在mRNA和蛋白水平均显着增加（P<0.05）,表明YAP1/TAZ可负向调节p63表达。4.miR-944对YAP1/TAZ表达的影响:miR-944 mimics转染A549、H520和A431细胞后观察对YAP1/TAZ表达的影响。A549细胞中,过表达miR-944可显着抑制YAP1与TAZ在mRNA及蛋白水平表达（P<0.05）;H520细胞中,过表达miR-944可抑制YAP1在mRNA及蛋白水平表达（P<0.05）,同时抑制TAZ mRNA表达（P<0.05）;A431细胞中,过表达miR-944可抑制TAZ mRNA表达（P<0.05）。结果表明miR-944可不同程度地抑制YAP1/TAZ表达。5.YAP1及p63在NSCLC组织中的表达及与临床病理特征的相关分析:免疫组化检测结果表明,在90例肺癌组织中,YAP1阳性表达率为77%（69/90）,其中50%的病例中呈现高表达,并且在肺腺癌组织中的高表达率显着高于鳞癌组织（79%V.S.25%,P<0.05）。p63阳性表达率为53%（48/90）,其在肺鳞癌组织中的表达显着高于肺腺癌中（100%V.S.0%,P<0.05）。进一步分析发现两者表达均与性别有关,YAP1表达在女性高于男性（P<0.05）,而p63表达在男性高于女性（P<0.05）。此外,p63表达与肿瘤大小显着相关（P<0.05）。6.miR-944、p63及YAP1在NSCLC组织中表达的相关分析:90例NSCLC组织中,miR-944在鳞癌中的表达显着高于腺癌组织（P<0.05）。Spearman相关分析表明,90例NSCLC组织中,miR-944与p63表达呈显着正相关关系（r=0.955,P<0.05）,两者与YAP1表达均呈明显负相关关系（miR-944与YAP1:r=﹣0.535,P<0.05;p63与YAP1:r=﹣0.535 P<0.05）。小结:1.诱导细胞中p63表达可增加miR-944表达,敲低细胞中p63表达后miR-944表达也随之降低,表明p63可正向调控miR-944表达。2.过表达或敲低miR-944可显着增加或降低细胞中p63表达,表明miR-944可以正向调控多个细胞中p63表达,结果提示miR-944与其Host gene p63基因以正反馈方式相互调节表达。3.YAP1/TAZ可抑制细胞中p63基因表达,而miR-944过表达可抑制YAP1或TAZ表达,解除YAP1/TAZ对p63基因的抑制作用,是miR-944促进其Host gene p63表达的机制之一。4.YAP1蛋白在肺腺癌组织中的表达显着高于肺鳞癌,而P63蛋白阳性表达主要见于肺鳞癌中,且与肿瘤大小或性别相关。5.NSCLC组织中miR-944与p63蛋白表达呈显着正相关关系,两者与YAP1表达呈显着负相关关系。第三部分:miR-944在肺鳞癌与肺腺癌病理诊断中的作用目的:筛选验证miR-944等miRNAs在肺鳞癌与腺癌鉴别诊断中的意义。方法:收集术前未经放疗化疗的原发NSCLC患者手术切除新鲜标本128例、石蜡包埋组织112例以及支气管灌洗液（BAL）样本127例。按照试剂盒步骤提取上述组织或细胞中的总RNA,采用Taqman microRNA assay方法检测组织中miRNAs表达;应用微滴式数字PCR（Droplet digital PCR,ddPCR）技术检测支气管灌洗液细胞中miRNAs表达。通过逐步logistic回归模型（Stepwise logistic regression models）确立miRNAs诊断标记物组,进一步采用多元线性模型（Stepwise backward model）筛选最适于肺鳞癌与腺癌鉴别诊断的miRNA分子;利用ROC曲线（Receiver Operating Characteristic）及曲线下面积（Aera Under the ROC Curve,AUC）评价miRNA在肺鳞癌与腺癌诊断的准确性;采用McNemar卡方检验分析miRNA模型与细胞学检测的差异。此外,为了评价miR-944的转录成熟过程,进一步采用Taqman探针法检测11例新鲜冻存鳞癌组织中Pri-miR-944表达情况。P<0.05认为差异具有统计学意义。结果:1.建立肺鳞癌与腺癌鉴别相关miRNA-based模型:根据之前筛选结果以及文献报道,选择7个miRNAs在128例（62例鳞癌、66例腺癌）新鲜组织中进行检测。结果表明,除外miR-21-5p,6个mi RNAs（miRs-205-5p,-944,-34a,-135a-5p,-375,-577）在肺鳞癌与腺癌组织中表达差异显着（P<0.05）,其中以mi R-205-5p、miR-944差异最为显着。进一步统计分析发现,miRNA-based模型（mi R-205-5p与miR-944联合检测）鉴别肺鳞癌与腺癌的AUC值为0.988,准确性、灵敏度和特异性分别为96.48%、96.55%和96.43%。2.验证肺鳞癌与腺癌鉴别相关miRNA-based模型:在112例（鳞癌55例、腺癌57例）石蜡组织中验证miR-205-5p以及miR-944表达及诊断意义。结果表明,miR-205-5p以及miR-944表达在鳞癌组织中显着高于腺癌（P<0.05）,且两者联合检测鉴别肺鳞癌与腺癌的AUC值为0.986,准确性、灵敏度和特异性均为96.43%,表明miRNA-based模型在肺鳞癌和腺癌鉴别中具有很高的预测意义。3.miRNA-based模型在支气管灌洗液标本诊断中的意义:进一步在127例（鳞癌82例、腺癌45例）BAL标本中分析miR-205-5p以及mi R-944表达及应用价值。结果表明,两者联合检测鉴别肺鳞癌与腺癌的AUC值为0.997,准确性、灵敏度和特异性分别为96.12%、95.00%和96.83%。而细胞学检测仅在58例BAL标本中能够进行形态学诊断（45.6%）,显着低于miRNAs标记物的诊断率（P<0.05）。4.Pri-miR-944与成熟miR-944表达的关系:以miR-205为参照,在11例新鲜冻存SCC组织中分析了Pri-miR-944与成熟mi R-944表达的相对比值。结果表明,成熟miR-205-5p的表达量显着高其初级转录本Pri-miR-205的表达（P<0.05）,但是成熟miR-944与Pri-miR-944表达无明显差异。与mi R-205/Pri-miR-205相比,11例SCC组织中mi R-944/Pri-mi R-944的比值显着降低（P<0.05）。小结:1.miR-205-5p、miR-944、mi R-34a、miR-135a-5p、miR-375、miR-577在肺鳞癌和腺癌中的表达均有显着差异,其中miR-944、miR-205-5p在肺鳞癌中高表达最为显着。2.NSCLC新鲜冻存组织以及石蜡组织中联合检测miR-205-5p与miR-944表达均可作为肺鳞癌与腺癌鉴别的重要标记分子。3.与细胞学检测相比,在支气管灌洗液标本中联合检测miR-205-5p与miR-944表达,不仅可以显着提高肺癌的诊断率,同时可以区分肺鳞癌与腺癌组织学类型。4.从初级转录本到成熟过程中miR-944的效率低于miR-205-5p,是引起mi R-944在NSCLC组织中相对低表达的原因之一。结论:1.miR-944参与调控NSCLC细胞及皮肤鳞癌A431细胞的增殖、迁移及凋亡过程,发挥癌基因作用。2.p63可正向调控intronic miR-944表达,反过来miR-944又可促进多个细胞中host gene p63的表达。在NSCLC组织中两者表达高度正相关,表明miR-944与host gene p63基因间存在相互的正反馈调节机制。3.YAP1蛋白在肺腺癌组织中的表达显着高于肺鳞癌,而P63蛋白作为鳞癌标记分子主要表达于肺鳞癌中,两者表达呈显着负相关关系。敲低细胞中YAP1或TAZ表达可促进p63基因表达,提示YAP1/TAZ对p63基因表达的抑制作用。4.mi R-944可抑制YAP1或TAZ表达,解除YAP1/TAZ对p63基因的抑制作用。miR-944—YAP1/TAZ—p63通路是Intronic mi R-944促进其host gene p63表达的机制之一。5.miR-205-5p与miR-944在肺鳞癌中表达显着高于肺腺癌,两者联合检测在手术切除新鲜组织、石蜡组织中均可作为肺鳞癌与腺癌鉴别的重要标记分子。尤其在支气管灌洗液标本中,miR-205-5p与mi R-944联合检测不仅可以提高肺癌的诊断率,同时可以区分肺鳞癌与腺癌组织学类型,具有重要的临床意义。
王燕晓[10]（2017）在《新型基因修饰肺癌小鼠模型的研制及其分子机制研究》文中研究表明肺癌是世界范围内发生率和死亡率均位居首位的恶性肿瘤,其中肺腺癌和肺鳞癌是肺癌的两大主要组织病理类型。肺癌的病因及发病机制复杂,至今尚未完全阐明。尽管人肺鳞癌的基因组改变已经被揭示,我们对能够起始鳞癌的分子和信号通路还知之甚少,加之目前能够模拟人类肺鳞癌分子改变的小鼠模型稀缺,严重阻碍了对肺鳞癌发病机制的理解和药物开发。本研究通过建立新的肺鳞癌和肺腺癌遗传修饰小鼠模型,探讨了转化生长因子-β（transforing growth factor-β,TGF-β）信号通路和甲基转移酶Zeste基因增强子同源物2（enhancer zeste homolog 2,EZH2）在肺癌发生发展中的作用及其机制。TGF-β配体与细胞膜上的受体结合后通过SMADs介导的经典通路和不依赖于SMADs的非经典通路实现对下游靶分子的调节。研究表明TGF-β信号通路异常参与多种上皮肿瘤的发生,然而它在肺鳞癌发生中的作用尚存在质疑。在本研究中,通过分析癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas Research,TCGA）数据库中人肺鳞癌和肺腺癌TGF-β信号通路重要分子DNA改变,我们发现TGF-βII型受体（TGF-βtype II receptor,TGFBR2）和SMAD4基因缺失十分常见,并且其低表达与预后差相关。小鼠体内结果显示在KrasG12D诱导的肺腺癌小鼠模型中,Tgfbr2协同缺失改变了肺癌的病理类型,导致肺鳞癌的发生。更为重要的是肺鳞癌广泛转移至胸腔淋巴结、心耳及肾。在Kras和p53双突变诱导的另一经典肺腺癌模型中,Tgfbr2协同缺失同样能够起始转移性肺鳞癌。我们发现Tgfbr2缺失诱导的肺鳞癌小鼠模型不仅能够模拟人类肺鳞癌病理特征和进程,其鳞癌呈现的分子表达改变也与人类肺鳞癌类似,包括高表达的cyclin D1、SPP1和CD44,以及激活的Akt、EGFR和STAT3信号通路,提示这些信号通路可能参与Tgfbr2缺失导致的鳞癌的发生及转移。在分子机制上,我们发现Tgfbr2通过经典SMAD4信号通路与旁路ERK1/2协同抑制肺鳞癌分化关键转录因子SOX2和TP63的表达。综上所述,我们证实了Tgfbr2在抑制肺鳞癌发生中的重要作用,揭示了肺鳞癌发生的新机制。同时我们获得了2种表型稳定、遗传背景清晰的肺鳞癌高转移小鼠模型,为肺鳞癌诊断标志物和治疗靶标的筛选提供了全新的动物模型。甲基转移酶Ezh2能够通过甲基化组蛋白3第27位赖氨酸（H3K27）介导靶基因的转录抑制。之前的研究表明Ezh2可作为原癌基因起始小鼠肺腺癌。在本研究中,我们通过对TCGA数据库肺腺癌数据进行分析,发现14%（33/230）的人肺腺癌患者样本中存在EZH2的删除和突变,提示EZH2的缺失可能参与肺腺癌的发生发展。意外的是,小鼠体内研究表明Ezh2删除能够显着促进KrasG12D所起始的肺腺癌发生。KrasG12D和Ezh2双基因突变小鼠生存时间缩短、肿瘤数目增多、肿瘤负荷增加,证明Ezh2在KrasG12D导致的肺腺癌中发挥肿瘤抑制而非促进作用。进一步的分子机制研究揭示,Ezh2缺失通过解除对其靶基因胰岛素样生长因子1（insulin-like growth factor 1,Igf-1）的转录抑制,进一步激活Akt和Erk信号通路从而促进肺腺癌发生。与此同时,我们发现Ezh2缺失可能通过促进肺腺癌局部炎症反应促进KrasG12D诱发的肺腺癌进展。
二、皮肤鳞癌中p63表达和巨噬细胞反应的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、皮肤鳞癌中p63表达和巨噬细胞反应的研究（论文提纲范文）
（2）miRNA-106a在头颈鳞癌中的表达及其临床意义（论文提纲范文）
| 中英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 miRNA与头颈鳞癌研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（5）肺腺癌免疫组化标记物的临床应用及其与基因突变关系的研究进展（论文提纲范文）
| 一、TTF-1的生物学特征与功能 |
| 二、NapsinA的生物学特征与功能 |
| 三、CK7的生物学特征与功能 |
| 四、TTF-1与NapsinA在肺癌诊断中的价值 |
| 五、TTF-1与Napsin A表达在肺癌患者中生存预后的价值 |
| 六、TTF-1与NapsinA表达与基因突变的相关性 |
| 七、TTF-1与NapsinA表达与基因突变相关性研究的意义 |
| 小 结 |
（6）YBX3对舌鳞癌细胞生长行为的影响及其分子机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 第1章 引言 |
| 1.1 舌鳞状细胞癌概述 |
| 1.2 YBX3 与生长调控 |
| 1.3 Wnt/β-Catenin信号通路 |
| 1.4 细胞自噬与m TOR通路 |
| 第2章 材料和方法 |
| 2.1 临床组织样本的免疫组织化学染色 |
| 2.1.1 舌鳞癌组织病理样本和正常舌鳞状上皮组织样本的收集 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.1.4 主要溶液的配制 |
| 2.1.5 免疫组织化学染色 |
| 2.1.6 统计学分析 |
| 2.2 细胞和材料 |
| 2.2.1 细胞系和细胞培养 |
| 2.2.2 主要试剂 |
| 2.2.3 主要仪器 |
| 2.2.4 相关试剂配置 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 舌鳞癌细胞的复苏、传代、冻存 |
| 2.3.2 siRNA转染实验 |
| 2.3.3 EdU细胞增殖检测实验 |
| 2.3.4 细胞周期检测 |
| 2.3.5 激光共聚焦显微镜观察自噬水平 |
| 2.3.6 RNA 提取和qRT-PCR |
| 2.3.7 Western Blot检测蛋白表达水平 |
| 2.3.8 统计学分析 |
| 第3章 实验结果 |
| 3.1 YBX3 在临床组织中的表达水平及分布 |
| 3.2 YBX3 降表达抑制舌鳞癌细胞增殖并造成细胞周期阻滞 |
| 3.2.1 siRNA技术敲低舌鳞癌细胞中YBX3 的表达 |
| 3.2.2 YBX3 降表达抑制舌鳞癌细胞增殖 |
| 3.2.3 YBX3 降表达阻滞舌鳞癌细胞周期 |
| 3.3 YBX3 降表达诱导舌鳞癌细胞自噬 |
| 3.4 YBX3 通过Wnt/β-Catenin和 m TOR信号通路影响舌鳞癌细胞增殖、细胞周期及自噬 |
| 第4章 讨论 |
| 4.1 YBX3 在不同临床样本中的表达情况 |
| 4.2 YBX3 的功能 |
| 第5章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 进一步工作的方向 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述 YBX3的功能探究 |
| 参考文献 |
（7）NQO1基因及阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌增殖、凋亡、侵袭迁移的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词 |
| 第1章 绪论 |
| 第2章 文献综述 |
| 2.1 流行性学 |
| 2.2 病因及发病机制 |
| 2.2.1 紫外线 |
| 2.2.2 乳头瘤病毒感染 |
| 2.2.3 机体免疫状态 |
| 2.2.4 化学致癌物 |
| 2.2.5 基因突变 |
| 2.2.6 家族史 |
| 2.2.7 其他相关皮肤病 |
| 2.2.8 其他因素 |
| 2.3 治疗 |
| 2.3.1 手术治疗 |
| 2.3.2 激光治疗和冷冻治疗 |
| 2.3.3 靶向治疗 |
| 2.3.4 放射治疗 |
| 2.3.5 基因治疗 |
| 2.3.6 光动力疗法 |
| 2.3.7 其他疗法 |
| 2.4 随访 |
| 2.5 小结 |
| 第3章 NQO1 对皮肤鳞状细胞癌增殖、侵袭转移的影响及机制研究 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 组织标本及细胞 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 主要试剂盒 |
| 3.1.4 主要仪器 |
| 3.1.5 实验方法 |
| 3.1.6 统计学分析 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 NQO1 在皮肤鳞状细胞癌内的表达水平 |
| 3.2.2 NQO1 对细胞增殖和平板克隆形成活性的影响 |
| 3.2.3 NQO1 对细胞增殖相关分子水平的影响 |
| 3.2.4 NQO1 对侵袭和迁移的影响 |
| 3.2.5 NQO1对EMT相关细胞内信号分子的影响 |
| 3.2.6 NQO1对SCC细胞内ROS水平的影响 |
| 3.2.7 NQO1 抑制剂双香豆素对细胞增殖和克隆形成的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第4章 阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌的抗肿瘤作用及机制研究 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.1.1 组织标本及细胞 |
| 4.1.2 主要试剂 |
| 4.1.3 主要试剂盒 |
| 4.1.4 主要实验仪器 |
| 4.1.5 实验方法 |
| 4.1.6 统计学分析 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 阿苯达唑的结构 |
| 4.2.2 阿苯达唑对鳞状细胞癌细胞系的细胞毒作用 |
| 4.2.3 阿苯达唑诱导SCC12和SCC13 细胞凋亡 |
| 4.2.4 阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌的特异性作用 |
| 4.2.5 阿苯达唑诱导CSCC的凋亡与内质网应激有关 |
| 4.2.6 阿苯达唑和内质网应激诱导剂衣霉素对CSCC影响 |
| 4.2.7 阿苯达唑对CSCC和角质形成细胞内质网应激的影响 |
| 4.2.8 阿苯达唑对肿瘤干细胞特性的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第5章 结论 |
| 全文总结及创新点 |
| 参考文献 |
| 在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（8）Notch信号的关键靶标PLEC在调节鳞状上皮稳态和参与食管鳞癌致癌机理中的研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 基金资助 |
| 博士在读期间即将发表的英文文章 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（9）非小细胞肺癌中miR-944的功能、诊断意义及与Host gene p63表达相关性的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 miR-944在非小细胞肺癌细胞中生物学作用的体外实验研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 miR-944与Host gene p63在非小细胞肺癌中表达的相关性研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 miR-944在肺鳞癌与肺腺癌病理诊断中的作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 非小细胞肺癌组织病理分型相关标记物的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（10）新型基因修饰肺癌小鼠模型的研制及其分子机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词中英文对照 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 肺癌及其发生机制 |
| 1.1.2 肺腺癌 |
| 1.1.3 肺鳞癌 |
| 1.2 TGF-β信号通路异常参与肺癌的发生与发展 |
| 1.3 EZH2异常参与肺癌的发生与发展 |
| 1.4 科学问题 |
| 1.5 主要研究内容及目标 |
| 1.6 拟采取的研究方案、技术路线 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 小鼠基因组DNA提取 |
| 2.3 小鼠基因型鉴定 |
| 2.4 肺癌小鼠模型建立 |
| 2.5 组织切片准备 |
| 2.6 组织切片 HE 染色 |
| 2.7 组织切片免疫组化染色 |
| 2.8 石蜡切片的免疫荧光染色 |
| 2.9 体外细胞系实验 |
| 2.10 蛋白的提取及 Western blot 检测 |
| 2.11 肿瘤组织或细胞系 RNA 的提取 |
| 2.12 RNA反转录 |
| 2.13 Quantitative Real-Time PCR |
| 2.14 衰老相关 β-gal 染色 |
| 2.15 流式细胞术 |
| 2.16 MTS 细胞增殖检测 |
| 2.17 统计学分析 |
| 第三章 实验结果 |
| 3.1 TGF-β信号通路异常导致肺癌发生 |
| 3.1.1 人肺癌样本常伴 TGF-β 信号通路的失调 |
| 3.1.2 Smad4 缺失促进Kras~(G12D/+)小鼠肺腺癌发生 |
| 3.1.3 Tgfbr2 缺失导致KrasG12/+小鼠发生转移性肺鳞癌 |
| 3.1.4 TGF-β信号通路阻断导致鳞癌发生的分子机制 |
| 3.2 Ezh2 缺失促进Kras~(G12D)诱导的肺腺癌发生 |
| 3.2.1 人肺腺癌样本中常伴EZH2改变 |
| 3.2.2 Ezh2 缺失促进Kras~(G12D/+)小鼠肺腺癌发生 |
| 3.2.3 Ezh2缺失通过解除对Igf1的抑制进一步激活ERK和AKT |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 第六章 参考文献 |
| 附录 在读期间发表论文 |
| 个人简介 |
| 致谢 |
四、皮肤鳞癌中p63表达和巨噬细胞反应的研究（论文参考文献）
- [1]RNA干扰RPL34基因敲低对人皮肤鳞癌SCL-1细胞的影响实验研究[D]. 张雪丽. 内蒙古医科大学, 2021
- [2]miRNA-106a在头颈鳞癌中的表达及其临床意义[D]. 陈航琦. 遵义医科大学, 2021(01)
- [3]肾透明细胞癌中Claudin-8的表达及其意义[D]. 孙涛. 中国医科大学, 2021
- [4]血浆SHOX2和RASSF1A甲基化表达情况与恶性肺结节的关系[D]. 王春秀. 华北理工大学, 2021
- [5]肺腺癌免疫组化标记物的临床应用及其与基因突变关系的研究进展[J]. 杨翠林,自宝莉,李萍,周开华. 临床肺科杂志, 2021(07)
- [6]YBX3对舌鳞癌细胞生长行为的影响及其分子机制的研究[D]. 李佳伦. 南昌大学, 2021(01)
- [7]NQO1基因及阿苯达唑对皮肤鳞状细胞癌增殖、凋亡、侵袭迁移的影响及机制研究[D]. 张青玲. 吉林大学, 2020(08)
- [8]Notch信号的关键靶标PLEC在调节鳞状上皮稳态和参与食管鳞癌致癌机理中的研究[D]. 乔丽丽. 北京协和医学院, 2020
- [9]非小细胞肺癌中miR-944的功能、诊断意义及与Host gene p63表达相关性的研究[D]. 李辉. 河北医科大学, 2018(12)
- [10]新型基因修饰肺癌小鼠模型的研制及其分子机制研究[D]. 王燕晓. 上海交通大学, 2017