一、内皮素-1对培养的兔角膜内皮细胞的影响（论文文献综述）
陈水龄[1]（2020）在《姜黄素抑制实验性脉络膜新生血管的机制研究》文中进行了进一步梳理第一章目的采用 532nm倍频激光建立实验性脉络膜新生血管（Choroidal Neovascularization,CNV）动物模型,为CNV的相关基础研究提供模型参考。方法1.应用532nm倍频激光光凝棕色挪威（Brown Norway,BN）大鼠建立实验性CNV模型,分别在光凝后1d、3d、5d、7d、14d、21d采用眼底照、眼底荧光血管造影（Fundus Fluorescein Angiograph,FFA）和吲哚菁绿血管造影（Indocyanine green Angiography,ICGA）观察光凝后不同时间点 CNV 的变化情况。2.制作BN大鼠CNV眼组织病理学标本,采用HE染色法观察光凝后不同时间点CNV中央厚度。3.制作BN大鼠CNV眼组织病理学标本,采用免疫组织化学染色法观察光凝后不同时间点CNV眼组织中CD105因子表达的情况。结果1.光凝后1d光斑处无荧光素渗漏;光凝后3d、5d仅有少量光斑处有荧光素渗漏。光凝后7d CNV生成率为70.18%,荧光素渗漏平均光密度值为128.30±11.21。光凝后14d CNV生成率为78.18%,平均光密度值为182.12±6.59,与光凝后7d组比较差异有统计学意义（P<0.05）。光凝后21d,CNV生成率和荧光素渗漏平均光密度值与光凝后14d组比较差异无统计学意义。2.HE染色结果显示:随着光凝后时间的增加,CNV中央厚度逐渐增加,光凝后7d CNV厚度为48.92±2.81μm,较光凝后1d显着增加（P<0.05）;光凝后14d CNV厚度为61.98±5.06μm,较光凝后7d显着增加（P<0.05）;光凝后21d CNV厚度为61.78±4.03μm,与14d组比较差异无统计学意义。3.CD105免疫组化结果显示:正常组视网膜组织CD105表达呈阴性,光凝后1d、3d、5d组光斑处可见少量棕黄色反应物表达,光凝后7d组光斑处棕黄色反应物逐渐增多（P<0.05）,光凝后14d组较光凝后7d组比较显着增加（P<0.05）,光凝后21d组与光凝后14d组比较差异无统计学意义。结论1.应用532nm激光光凝可以成功建立BN大鼠实验性CNV动物模型。2.CNV在光凝后7d至14d生长迅速,至21d逐渐稳定,此模型具有成模速度快,成模率高、重复性好、成本低的优点,可作为CNV基础研究的动物模型。3.眼底照、FFA、ICGA、HE染色和免疫组化检查可以动态观察CNV的变化。第二章目的观察中药单体姜黄素对BN大鼠实验性CNV的抑制作用,以及对AKT/p-AKT/HIF-1 α/VEGF信号通路活性的影响,为姜黄素治疗CNV提供实验依据。方法1.应用532nm倍频激光光凝诱导BN大鼠建立CNV模型,造模后的大鼠被随机分为正常组、模型组、雷珠单抗组、姜黄素低剂量组、姜黄素中剂量组和姜黄素高剂量组,在光凝后14d进行眼底照、FFA与ICGA检查。2.制作BN大鼠CNV眼组织病理学标本,采用HE染色法观察不同组CNV中央厚度。3.制作BN大鼠CNV眼组织病理学标本,采用免疫组织化学法观察不同组CNV眼组织中AKT/p-AKT/HIF-1α/VEGF信号通路各因子蛋白的表达情况。4.采用RT-qPCR法检测CNV眼组织中AKT/HIF-1α/VEGF信号通路各因子mRNA的相对表达量。5.采用蛋白免疫印迹（Western blot）法检测CNV眼组织中AKT/p-AKT/HIF-1α/VEGF信号通路各因子蛋白的相对表达量。结果1.正常组未打激光,模型组,雷珠单抗组,姜黄素低、中、高剂量组CNV生成率分别为78.18%、73.21%、77.19%、75.86%、74.55%,组间比较差异无统计学意义;荧光素渗漏平均光密度值分别为182.12±6.59、119.22±8.03、166.45±8.33、164.34±5.69、149.22±6.45;雷珠单抗组较模型组显着降低（P<0.05）;姜黄素低、中、高剂量组较雷珠单抗组显着升高（P<0.05）,其中姜黄素高剂量组较模型组显着降低（P<0.05）。2.HE染色结果显示:正常组BN大鼠视网膜组织各层结构清晰、排列整齐。光凝后14d,雷珠单抗组CNV中央厚度较模型组显着减少（P<0.05）;姜黄素低、中剂量组与模型组比较差异无统计学意义;姜黄素高剂量组较模型组显着减少（P<0.05）,较雷珠单抗组显着增加（P<0.05）。3.免疫组化结果显示:正常组BN大鼠视网膜组织结构中AKT、p-AKT、HIF-1α、VEGF因子表达呈阴性,未见棕黄色反应物。光凝后14d,模型组光斑处AKT、p-AKT、HIF-1α、VEGF因子的表达高于正常组（P<0.05）;雷珠单抗组低于模型组（P<0.05）;姜黄素低剂量组、中剂量组AKT、p-AKT、HIF-1α、VEGF因子的表达与模型组比较差异无统计学意义;姜黄素高剂量组的表达较模型组显着降低（P<0.05）;较雷珠单抗组显着增加（P<0.05）。4.mRNA结果显示:光凝后14d,模型组AKT、HIF-1α和VEGF mRNA相对表达量均高于正常组（P<0.05）;雷珠单抗组均低于模型组（P<0.05）;姜黄素低、中剂量组与模型组比较差异无统计学意义;姜黄素高剂量组较模型组显着降低（P<0.05）,较雷珠单抗组显着增加（P<0.05）。5.Westernblot结果显示:光凝后14d,AKT蛋白各组间比较差异无统计学意义。p-AKT蛋白相对表达量模型组较正常组显着增加（P<0.05）;雷珠单抗组较模型组显着降低（P<0.05）;姜黄素低、中剂量组与模型组比较差异无统计学意义;姜黄素高剂量组较模型组显着降低（P<0.05）。HIF-1α蛋白相对表达量模型组较正常组显着增加（P<0.05）,雷珠单抗组较模型组显着降低（P<0.05）,姜黄素低、中剂量与模型组比较差异无统计学意义,姜黄素高剂量组较模型组显着降低（P<0.05）,较雷珠单抗组显着增加（P<0.05）。VEGF蛋白相对表达量模型组较正常组显着增加（P<0.05）,雷珠单抗组较模型组显着降低（P<0.05）,姜黄素低剂量组与模型组比较差异无统计学意义,姜黄素中、高剂量组较模型组显着降低（P<0.05）。结论1.高剂量姜黄素（400mg/Kg/d）对激光诱导的BN大鼠实验性CNV的形成具有抑制作用。2.姜黄素抑制BN大鼠实验性CNV的机制可能与抑制AKT/p-AKT/HIF-1α/VEGF信号通路的激活,降低相关因子的表达有关。第三章目的观察姜黄素对氯化钴（CoCl2）诱导的人视网膜色素上皮细胞株-19（adult retinal pigment epithelial cell line-19,ARPE-19）细胞缺氧模型中 AKT、HIF-1 α 和VEGF因子mRNA及蛋白表达的影响。方法1.采用CoCl2诱导ARPE-19细胞建立化学性缺氧模型,应用CCK-8法筛选造模试剂CoCl2、实验药物姜黄素和阳性对照药雷珠单抗的浓度,同时检测姜黄素对CoCl2诱导的ARPE-19细胞活性的影响。2.将ARPE-19细胞分为正常组、模型组、雷珠单抗组、姜黄素低、中、高剂量组,应用RT-qPCR法检测姜黄素对CoCl2诱导的ARPE-19细胞缺氧模型AKT、HIF-1α和VEGF mRNA表达量的影响。3.将ARPE-19细胞分为正常组、模型组、雷珠单抗组、姜黄素低、中、高剂量组,应用Westernblot法检测姜黄素对CoCl2诱导的ARPE-19细胞缺氧模型AKT、p-AKT、HIF-1α和VEGF蛋白表达量的影响。结果1.CCK-8细胞活性检测:随着CoCl2浓度的增加,ARPE-19细胞活性呈现先增长后抑制,当CoCl2终浓度≥200μM时,细胞活性显着降低（P<0.05）。姜黄素终浓度在0-100μM时,ARPE-19细胞活性未见异常;当浓度≥200μM时,细胞活性显着降低（P<0.05）。雷珠单抗在终浓度为20μg/mL时,细胞活性较CoCl2组显着降低（P<0.05）,与正常组比较差异无统计学意义;当浓度为40μg/mL、80μg/mL时,细胞活性较CoCl2组和正常组均显着降低（P<0.05）。因此,我们选择终浓度100μM的CoCl2作为造模浓度;终浓度6.25μM、25μM、100μM的姜黄素作为低、中、高剂量组浓度;终浓度为20μg/mL的雷珠单抗作为阳性对照药物的浓度。2.RT-qPCR结果显示:模型组AKT、HIF-1α和VEGF mRNA相对表达量均高于正常组（P<0.05）;雷珠单抗组均低于模型组（P<0.05）;姜黄素低、中剂量组与模型组比较差异无统计学意义（P<0.05）;姜黄素高剂量组较模型组显着降低（P<0.05）;与雷珠单抗组比较差异无统计学意义。3.Westernblot结果显示:AKT蛋白相对表达量各组间比较差异无统计学意义。p-AKT和HIF-1α蛋白相对表达量模型组均高于正常组（P<0.05）,雷珠单抗组均低于模型组（P<0.05）,姜黄素低、中剂量组与模型组比较差异无统计学意义（P<0.05）,姜黄素高剂量组较模型组显着降低（P<0.05）,与雷珠单抗组比较差异无统计学意义。VEGF蛋白相对表达量模型组高于正常组（P<0.05）,雷珠单抗组低于模型组（P<0.05）,姜黄素低剂量与模型组比较差异无统计学意义;姜黄素中、高剂量组较模型组显着降低（P<0.05）,与雷珠单抗组比较差异无统计学意义。结论1.应用CoCl2可成功建立APRE-19细胞化学缺氧模型。2.CoCl2在终浓度为100μM时可增加细胞中AKT、HIF-1α和VEGF mRNA及p-AKT、HIF-1α和VEGF蛋白的表达量。3.高剂量姜黄素（100μM）可降低CoCl2诱导的ARPE-19细胞中AKT、HIF-1α和 VEGF mRNA 及 p-AKT、HIF-1α 和 VEGF 蛋白的表达。4.姜黄素（100μM）对CoCl2诱导ARPE-19细胞缺氧具有保护作用。第四章目的观察ARPE-19细胞的各组条件培养液对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）细胞增殖、迁移、侵袭和管腔形成的影响。方法1.将ARPE-19细胞条件培养液分为正常组、模型组、雷珠单抗组、姜黄素低、中、高剂量组,分别作用于HUVEC细胞;采用CCK-8法观察ARPE-19细胞的各组条件培养液对HUVEC细胞活性的影响。2.采用细胞划痕实验观察在非接触情况下ARPE-19细胞的各组条件培养液对HUVEC细胞的水平迁移的影响。3.采用Transwell小室迁移实验观察在非接触情况下ARPE-19细胞的各组条件培养液对HUVEC细胞的垂直迁移的影响。4.采用Transwell小室侵袭实验观察在非接触情况下ARPE-19细胞的各组条件培养液对HUVEC细胞的侵袭的影响。5.采用Matrigel基质胶管腔形成实验,观察在非接触情况下ARPE-19细胞的各组条件培养液对HUVEC细胞管腔形成的影响。结果1.ARPE-19细胞的各组条件培养液对HUVEC细胞活性的影响,组间差异无统计学意义。2.HUVEC细胞水平迁移实验结果显示:与正常组比较模型组HUVEC细胞水平迁移显着增加（P<0.05）;与模型组比较雷珠单抗组水平迁移显着减少（P<0.05）;姜黄素条件培养液低（6.25μM）、中（25μM）、高（100μM）剂量组水平迁移较模型组显着减少（P<0.05）,其中,高剂量组与雷珠单抗组比较差异无统计学意义。3.HUVEC细胞垂直迁移实验结果显示:与正常组比较模型组HUVEC细胞垂直迁移显着增加（P<0.05）;与模型组比较雷珠单抗组垂直迁移显着减少（P<0.05）;姜黄素条件培养液低（6.25μM）、中（25μM）剂量组垂直迁移与模型组比较差异无统计学意义,姜黄素条件培养液高（100μM）剂量组垂直迁移较模型组显着减少（P<0.05）,与雷珠单抗组比较差异无统计学意义。4.HUVEC细胞侵袭实验结果显示:与正常组比较模型组HUVEC细胞侵袭显着增加（P<0.05）;与模型组比较雷珠单抗组细胞侵袭显着减少（P<0.05）;姜黄素条件培养液低（6.25μM）、中（25μM）剂量组细胞侵袭与模型组比较差异无统计学意义;姜黄素条件培养液高（100μM）剂量组较模型组细胞侵袭显着减少（P<0.05）,与雷珠单抗组比较差异无统计学意义。5.HUVEC细胞管腔形成实验结果显示:模型组管腔形成较正常组显着增加（P<0.05）;雷珠单抗组管腔形成较模型组显着较少（P<0.05）;姜黄素条件培养液低（6.25μM）剂量组管腔形成与模型组比较差异无统计学意义;姜黄素中（25μM）、高（100μM）剂量组管腔形成与模型组比较显着减少（P<0.05）,与雷珠单抗组比较差异无统计学意义。结论1.ARPE-19细胞姜黄素低（6.25μM）、中（25μM）、高剂量组（100μM）条件培养液可显着抑制HUVEC细胞水平迁移;其中高剂量组条件培养液可显着抑制HUVEC细胞垂直迁移。2.ARPE-19细胞姜黄素高剂量组（100μM）条件培养液可抑制HUVEC细胞侵袭。3.ARPE-19细胞姜黄素中（25μM）、高剂量组（100μM）条件培养液可抑制HUVEC细胞管腔形成。4.姜黄素可在细胞水平抑制血管的生成。
赵伟玮[2]（2012）在《兔角膜内皮损伤的组织工程修复》文中指出眼球外壁的前1/6透明圆盘状结构为角膜，主要起到保护眼球和作为屈光介质的作用。角膜从前向后分为5层：上皮层、前弹力层、基质层、后弹力层和内皮层，其中，内皮层由单层扁平或低立方内皮细胞构成，通过其Na+-K+ATP酶的“泵”功能维持角膜的“脱水状态”。成年角膜内皮细胞不能再生，细胞受损后由邻近细胞扩大、移行填补。当细胞密度下降到其临界值（700个/mm）时，角膜功能失代偿、角膜水肿浑浊，严重时致盲即为角膜内皮盲。目前，全世界有1100万角膜内皮盲患者，而临床唯一有效的角膜内皮盲治疗手段是穿透性角膜移植术，即角膜移植。但异体角膜移植存在着免疫排斥反应和供体缺乏等限制因素。因此，研究者们致力于组织工程角膜内皮的构建。目前，常用的种子细胞包括：角膜内皮细胞、胚胎干细胞、成体干细胞和具有干细胞性质的成体细胞；常用的生物材料支架包括异体或异种角膜或角膜板层、天然或合成高分子材料。本实验旨在通过以壳聚糖基水凝胶为支架、以体外培养的兔角膜内皮细胞为种子细胞构建组织工程角膜内皮并对兔角膜内皮损伤模型进行组织工程修复，为角膜内皮盲的治疗提供依据。本实验主要进行了以下几方面工作：（1）壳聚糖基水凝胶的毒性研究：对大鼠长期腹腔注射壳聚糖基水凝胶，通过监测大鼠一般临床状况，测定肝脏、肾脏、脾脏相关血清生化指标、脏器系数，观察病理切片等手段，评价该水凝胶对大鼠主要脏器的亚慢性毒性；以壳聚糖基水凝胶浸提液培养兔角膜内皮细胞，评价该水凝胶对兔角膜内皮细胞的毒性。（2）兔角膜内皮细胞培养基的优化：以含有几种壳聚糖衍生物的条件培养基培养兔角膜内皮细胞，通过定性观察和定量评价，筛选出能够在一定浓度下对兔角膜内皮细胞的生长具有显着促进作用，且对细胞形态无明显影响的糖类，以此优化培养基。（3）兔角膜内皮损伤模型的组织工程修复：通过揭除兔角膜后弹力层和内皮层的方式构建稳定、长久的兔角膜内皮损伤模型；以壳聚糖基水凝胶为生物材料支架、以利用优化培养基培养出的高活性兔角膜内皮细胞为种子细胞，对模型兔进行内皮损伤的组织工程修复，通过术后眼相观察、裂隙灯观察、角膜内表面扫描电镜观察和角膜纵切面组织切片观察，评价该方法的可行性。本实验得到以下结果：（1）该壳聚糖水凝胶对大鼠肝脏和脾脏未表现出明显毒性作用、对大鼠肾脏前期可引起轻微损伤，后期损伤恢复，推测为机体对水凝胶的适应反应，无蓄积毒性；该水凝胶对兔角膜内皮细胞无毒性的结论。（2）CM-CT、CS在一定浓度下（50100μg/mL）对兔角膜内皮细胞的生长具有显着促进作用，且对细胞形态无明显影响；以一定浓度混合后，混合糖的促细胞生长作用具有协同效应。（3）行角膜内皮损伤模型的建立和修复12周后，一半实验组模型兔术眼恢复透明，镜下观察有单层新生角膜内皮、细胞呈多边形。综上，本实验可得出以下结论：该壳聚糖基水凝胶适于作为组织工程角膜内皮的生物材料支架使用；利用含CM-CT、CS的优化培养基培养兔角膜内皮细胞可明显促进其生长；利用壳聚糖基水凝胶包封兔角膜内皮细胞对角膜损伤模型兔进行组织工程修复的方法具有一定可行性。
胡维琨,谢二娟,张虹,李贵刚,刘荣[3]（2010）在《氯通道阻断剂5-硝基-2-（3-苯丙胺）苯甲酸在内皮素-1对体外培养牛角膜内皮细胞增殖中的影响》文中指出目的观察氯通道阻断剂5-硝基-2-（3-苯丙胺）苯甲酸（NPPB）在内皮素-1（ET-1）对体外培养牛角膜内皮细胞增殖中的作用。方法实验设7组,对照组、1g·L-1二甲基亚砜（DMSO）组、200pmol·L-1ET-1组、200pmol·L-1ET-1+1g·L-1DMSO组和200pmol·L-1ET-1+50、100、200μmol·L-1NPPB3个实验组。采用倒置光学显微镜观察牛角膜内皮细胞形态。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色分析法观察细胞增殖,计算细胞存活率。采用免疫细胞化学检测细胞增殖细胞核抗原（PCNA）表达,并采用计算机图像分析测定平均光吸收值。应用流式细胞仪检测细胞周期时相的变化,计算细胞增殖指数。结果 NPPB能够使细胞形态发生异常,细胞内分裂相减少。50、100μmol·L-1NPPB使培养牛角膜内皮细胞MTT光吸收值、细胞存活率和PCNA阳性细胞的平均光吸收值较200pmol·L-1ET-1组均显着降低,并具有浓度依赖性。而NPPB浓度达到200μmol·L-1时,细胞趋于死亡。经100μmol·L-1的NPPB处理后,与对照组和200pmol·L-1ET-1组相比,出现明显的凋亡峰,G1期细胞比例明显增高,S期及G2/M期细胞比例则明显降低,增殖指数明显下降。结论 NPPB浓度依赖性抑制ET-1对培养BCECs的增殖作用,使细胞周期停滞在G1期。
胡维琨,谢二娟,张虹,李贵刚,刘荣[4]（2010）在《氯离子通道-3反义寡核苷酸对内皮素-1促增殖体外培养的牛角膜内皮细胞的抑制作用》文中研究指明目的观察氯离子通道-3（chloride channel3,ClC-3）反义寡核苷酸（antisense oli-gonucleotides,AS-ODN）对内皮素1（endothelin-1,ET-1）促增殖体外培养的牛角膜内皮细胞（bovine corneal endothelial cells,BCECs）的抑制作用。方法 BCECs细胞悬液接种培养12h后,通过脂质体介导转染不同浓度的ClC-3寡核苷酸。体外培养BCECs24h后加入200pmol.L-1ET-1,继续培养48h。通过倒置荧光显微镜观察BCECs寡核苷酸的摄取。采用逆转录聚合酶链反应、免疫印迹法检测ClC-3mRNA和蛋白的表达。采用MTT法观察BCECs增殖状况,计算细胞存活率,同时应用流式细胞仪检测细胞周期时相的变化,计算细胞增殖指数。结果寡核苷酸可被培养的BCECs摄取。ClC-3mRNA与蛋白的表达变化呈平行关系。与不加时相比,ClC-3AS-ODN浓度依赖性地减少BCECsClC-3mRNA和蛋白的表达,同样也浓度依赖性地降低BCECs MTT吸光度值（OD值）和细胞存活率。经100mg·mL-1ClC-3AS-ODN处理后,与对照组相比,细胞G0/G1期细胞比例明显增高,S期及G2期细胞比例则明显降低,出现明显的凋亡峰,增殖指数明显下降。结论 ClC-3AS-ODN可能通过减少ClC-3mRNA和蛋白的表达,浓度依赖性抑制ET-1对体外培养BCECs的增殖作用,并使细胞周期停滞在G1期。
张翠英,刘华[5]（2007）在《角膜内皮细胞的损伤及促进其修复的因素》文中研究说明角膜内皮创伤愈合早在19世纪就受到人们的重视,近年来对角膜内皮损伤的病理、愈合的过程、修复机制均有了更深刻的认识。很多学者对角膜内皮愈合过程中各种因子的促进作用进行了系统的研究。其中各种生长因子和纤维连接蛋白对角膜内皮的愈合有促进作用,层粘连蛋白、高糖、柔红霉素对角膜内皮细胞有损害作用。
位晓娟[6]（2007）在《多糖生物膜体外构建兔角膜内皮细胞载体及移植的研究》文中认为目的:角膜的高度透明性和光学性是正常发挥生理功能的必要条件之一,而角膜内皮细胞（corneal endothelial cell,CEC）在维持角膜的正常生理功能方面起重要作用。角膜内皮细胞是角膜后层的单层细胞,构成了后弹力层和房水之间的物理屏障,通过离子“泵”功能调节角膜中离子浓度和水分,维持角膜的半脱水状态,保证角膜的正常厚度和透明度。一旦角膜内皮细胞功能出现紊乱,常导致角膜水肿而使角膜部分甚至完全失去透明性。穿透性角膜移植术是目前取代病变或受损角膜,恢复角膜透明性的主要治疗方法,但供体来源短缺、供体质量的差异、部分排斥反应以及术后并发症等因素严重制约了角膜移植术的普及。研制人工角膜内皮作为人体角膜的等效物是解决上述问题的最有效方法。随着组织工程技术的兴起和发展,组织工程角膜成为诸多学者关注的研究热点。理想的人工角膜内皮应与受体组织有良好的生物相容性,故支架材料的选择是重要的影响因素。壳聚糖是一种聚阳离子多糖,其特有的理化性质已成为医药界及生物医学领域的研究热点。研究证明,壳聚糖具有良好的生物相容性、生物可降解性、降解可控性、抗眼组织纤维化以及抑菌性,在医用材料领域应用前景广阔。生物可降解物质壳聚糖及其衍生物作为角膜细胞载体是一个新的研究方向。本研究旨在探讨壳聚糖及其衍生物作为细胞活性载体进行角膜内皮损伤修复的应用前景。方法:试验分三部分:一、角膜内皮细胞的体外培养:启动兔、狗、猫角膜内皮细胞的原代及传代培养,摸索行之有效的角膜内皮细胞传代、保种方法,同时为得到足量种子细胞,探讨了海洋活性物质对兔角膜内皮细胞的促增殖作用。二、几种壳聚糖共混膜片的兔角膜内皮细胞相容性及其在兔前房组织相容性研究的比较:63101、63102、63103三种不同壳聚糖共混膜片作为载体,进行体外角膜内皮细胞培养,观察细胞相容性、贴附牢固度及膜片强度的观察;30只新西兰白兔分为三组,分别于前房内植入三种膜片,进行裂隙灯、角膜厚度、角膜内皮镜和组织学检查,比较三种共混膜片的前房相容性,另取3只新西兰白兔仅作前房穿刺,作为对照,以期筛选出适合角膜内皮细胞贴附生长、有移植可行性、有良好前房相容性的载体支架。三、兔角膜内皮细胞活性载片的培养及移植研究:选择性能最佳的载体膜片作为载体支架,体外培养兔角膜内皮细胞达适宜密度。取15只新西兰白兔制作兔眼角膜内皮损伤模型,其中3只原位缝合作空白组,其余12只随机分为2组,分别在角膜后弹力层面植入载有兔角膜内皮细胞的壳聚糖共混膜片和不载细胞的壳聚糖共混膜片,作为对照组和试验组,观察兔角膜内皮细胞活性载片对兔角膜内皮损伤的修复能力。结果:一、成功启动了兔角膜内皮细胞原代和传代培养,且此培养方法对于几乎无体内增殖能力的狗、猫角膜内皮细胞同样适用,说明其可能也适用于人角膜内皮细胞的培养;测定了兔角膜内皮细胞的DOT,并通过对细胞贴壁率、伸展率的测定,筛选了行之有效的兔角膜内皮细胞冻存方法;以EGF为对照,发现N-乙酰基葡萄糖和壳寡糖具有促进细胞生长和增殖的良好效果。二、在三种壳聚糖膜片中,63103组膜片与角膜内皮细胞相容性好,细胞可在膜上形成良好单层并且贴附牢固,膜片在经37℃孵育后仍保持良好的机械性能,有手术移植可行性;63103膜片与眼前房组织相容性良好,植入前房后炎症反应轻微。三、扫描电镜显示及LDH释放试验结果表明,生长在63103膜片上的角膜内皮细胞超微结构良好,与生长在细胞培养板上的细胞相比,细胞膜稳定性更佳。试验结果显示,该角膜内皮细胞活性载体膜片在兔眼眼内移植早期,与对照组相比,实验组移植区的透明率较高。结论:本研究中的壳聚糖共混膜作为生物组织工程中的载体支架材料,与角膜内皮细胞具有高亲合力,无毒并能促进细胞的增殖。膜片的理化特性可显着影响其生物组织相容性。生物相容性高的63103膜片能较好地保持角膜内皮细胞的形态和结构,对角膜内皮损伤有一定的修复作用,该细胞活性载片的角膜内皮损伤修复作用有待进一步研究证实。
郝兆芹,张林[7]（2006）在《角膜内皮细胞体外培养促增殖因素的研究进展》文中研究表明
孙扬[8]（2006）在《内皮素-1对体外培养的肉鸡肺动脉内皮细胞的影响》文中认为肉鸡肺动脉高压综合征（pulmonary hypertension syndrome，PHS），是一组以腹水为特征同时伴有心衰等症状的综合征，也是目前威胁肉鸡养殖业的主要疾病之一。内皮素-1（endothelia-1，ET-1）是一种由内皮细胞合成和分泌的、具有强烈收缩血管作用和促进细胞增生的血管活性多肽，心钠素（atrialnatriuretic peptide，ANP）、血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ，AⅡ）、NO等在心血管系统功能的调节中也起着重要作用。本次试验，通过在实验室条件下培养肉鸡肺动脉内皮细胞，以获取试验所需细胞，再通过给予肉鸡肺动脉内皮细胞外源性的不同浓度ET-1及L-Arg、L-Arg+ET-1和L-NAME，观察对细胞分泌情况有何影响。试验结果表明，通过外源性的ET-1的刺激，细胞产生NOS、ANP和AⅡ的量随ET-1浓度的增加而增加，并且对内皮细胞有促增殖作用，呈浓度依赖性。其中NOS的变化情况是cNOS的减少和iNOS的增加，而导致NOS总体上升，促进NO的分泌增多。外源性的L-Arg的补充，能促进肺动脉内皮细胞分泌NO增多，但对cNOS和iNOS无影响。NOS抑制剂L-NAME是通过降低cNOS的活性来实现的抑制肺动脉内皮细胞NO的生成，表明了其对cNOS由较强的选择性。L-Arg+ET-1共同作用肺动脉内皮细胞时是以ET-1的生物学效应发挥主要作用而起到的主导作用，从而影响肺动脉内皮细胞分泌变化的。通过本次研究，揭示了在正常生物体内是以ET-1为代表的AⅡ等缩血管因子和以NO为代表的ANP等舒张因子共同在心肺系统中发挥协同作用，维持机体正常平衡，在肉鸡腹水综合征的发生发展过程中发挥着重要的生理和病理作用。
刘蓉,张林[9]（2006）在《角膜内皮细胞电生理学特性的研究进展》文中认为
王建洲[10]（2005）在《内皮素在增生性玻璃体视网膜病变中作用的研究》文中提出研究背景和研究目的 增生性玻璃体视网膜病变（proliferative vitreoretinopathy,PVR）是孔源性视网膜脱离（Rhegmatogenousretinal detachment,RRD）及其视网膜复位手术后的并发症,也是手术失败的主要原因。既往研究证明视网膜色素上皮（retinal pigment epithelial,RPE）细胞是参与PVR的主要细胞,PVR是视网膜脱离后RPE细胞损伤的一种自我修复过程,是一种过度的眼内创伤修复反应。RPE细胞在正常位置上处于静止状态,而在某些病理条件下,如视网膜裂孔形成和视网膜脱离后,RPE细胞脱离原位,开始去分化、移行、增生、发生表型转化并分泌胶原等细胞外基质（extracellular matrice,ECM）,最终在视网膜前后表面和玻璃体内形成具有收缩能力的增生膜,造成牵拉性视网膜脱离。有多种蛋白和生长因子参与了这个过程。但是对PVR发生发展过程中,RPE细胞的生长调控机制仍有许多细节不明,影响了对PVR防治的进展。 内皮素（endothelin-1,ET-1）是最早从脐静脉内皮细胞条件培养基中发现的一种分子量为2.5KD的活性物质,是21个氨基酸残基多肽,有较强收缩血管作用。随后的研究发现,ET-1不仅仅是血管收缩剂,而且是一种多功能调节肽,具有广泛的生物学效应,具有介导炎症、刺激其它激素分泌、促有丝分裂、刺激细胞增殖、移行和粘附等多种功能,通过自分泌和旁分泌方式经受体发挥作用。细胞因子包括TGF-β,IL-1,TNF-α,IFN-γ和凝血酶能诱导ET-1的前体的转录和成熟ET-1的释放。相反,尿钠排泄因子包括心房利钠肽,心钠素（ANP）、脑利钠肽（BNP）和一氧化氮（NO）供体
二、内皮素-1对培养的兔角膜内皮细胞的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、内皮素-1对培养的兔角膜内皮细胞的影响（论文提纲范文）
（1）姜黄素抑制实验性脉络膜新生血管的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 引言 |
| 第一章 532nm倍频激光诱导BN大鼠脉络膜新生血管模型的建立 |
| 1. 实验动物、仪器、耗材与试剂 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验仪器及耗材 |
| 1.3 实验试剂 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 实验分组 |
| 2.2 532nm倍频激光建立CNV模型 |
| 2.3 眼底照相、FFA及ICGA观察CNV变化 |
| 2.4 制备病理学标本 |
| 2.5 HE染色 |
| 2.6 免疫组织化学检测 |
| 3. 图像分析与统计学方法 |
| 3.1 眼底照、FFA及ICGA图像 |
| 3.2 HE染色图像 |
| 3.3 免疫组化图像 |
| 3.4 统计学方法 |
| 4. 结果 |
| 4.1 眼底照、FFA与ICGA结果 |
| 4.2 HE染色结果 |
| 4.3 CD105免疫组化结果 |
| 5. 讨论 |
| 5.1 CNV模型建立的方法 |
| 5.2 532nm倍频激光诱导BN大鼠建立实验性CNV模型的机制 |
| 5.3 532nm倍频激光诱导BN大鼠CNV模型的评价 |
| 6. 结论 |
| 第二章 姜黄素通过AKT/p-AKT/HIF-1α/VEGF信号通路抑制BN大鼠CNV的实验研究 |
| 1. 实验动物、仪器、耗材与试剂 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验仪器与耗材 |
| 1.3 实验试剂 |
| 2. 实验方法 |
| 2.0 实验药物配制 |
| 2.1 实验分组及给药 |
| 2.2 532nm倍频激光建立实验性CNV模型 |
| 2.3 眼底照相、FFA及ICGA观察CNV变化 |
| 2.4 病理学标本制备 |
| 2.5 HE染色 |
| 2.6 免疫组织化学检测 |
| 2.7 RT-qPCR检测mRNA表达 |
| 2.8 Westernblot检测蛋白表达 |
| 3. 图像分析与统计学方法 |
| 3.1 眼底照、FFA与ICGA图像 |
| 3.2 HE染色图像 |
| 3.3 免疫组化图像 |
| 3.4 RT-qPCR结果分析 |
| 3.5 Westernblot结果分析 |
| 3.6 统计学方法 |
| 4. 实验结果 |
| 4.1 眼底照、FFA与ICGA结果 |
| 4.2 HE染色结果 |
| 4.3 免疫组化结果 |
| 4.4 RT-qPCR结果 |
| 4.5 Westernblot结果 |
| 5. 讨论 |
| 5.1 新生血管与中药单体 |
| 5.2 姜黄与姜黄素 |
| 5.3 姜黄素与眼部新生血管 |
| 5.4 CNV的中医认识 |
| 5.5 姜黄素抑制CNV的机制 |
| 6. 结论 |
| 第三章 姜黄素对CoCl_2诱导的ARPE-19细胞缺氧模型中AKT、HIF-1α和VEGF因子的影响 |
| 1. 实验细胞、试剂、药物及仪器 |
| 1.1 实验细胞 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验药物及溶液的配制 |
| 1.4 实验仪器 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 ARPE-19细胞复苏、传代与冻存 |
| 2.2 造模试剂CoCl_2、实验药物姜黄素及阳性对照药雷珠单抗浓度的筛选 |
| 2.3 实验分组与干预 |
| 2.4 CCK-8法检测实验各组ARPE-19细胞的活性 |
| 2.5 RT-qPCR检测 |
| 2.6 Westernblot检测 |
| 3. 结果分析与统计学方法 |
| 3.1 CCK-8检测细胞活性结果分析 |
| 3.2 RT-qPCR结果分析 |
| 3.3 Westernblot结果分析 |
| 3.4 统计学方法 |
| 4. 实验结果 |
| 4.1 正常ARPE-19细胞形态 |
| 4.2 CoCl_2对ARPE-19细胞活性的影响 |
| 4.3 姜黄素对ARPE-19细胞活性的影响 |
| 4.4 雷珠单抗对CoCl_2诱导的ARPE-19细胞活性的影响 |
| 4.5 RT-qPCR结果 |
| 4.6 Westernblot结果 |
| 5. 讨论 |
| 5.1 细胞缺氧模型的建立 |
| 5.2 CoCl_2诱导ARPE-19细胞缺氧模型的机制 |
| 5.3 姜黄素对CoCl_2诱导ARPE-19细胞缺氧的保护作用 |
| 6. 结论 |
| 第四章 非接触共培养体系观察ARPE-19细胞姜黄素的条件培养液对HUVEC细胞形态学的影响 |
| 1. 实验细胞、药物、试剂及仪器 |
| 1.1 实验细胞 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 实验试剂的配制 |
| 1.4 实验仪器 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 HUVEC细胞株复苏培养、传代与冻存 |
| 2.2 CCK-8检测 |
| 2.3 划痕实验检测细胞水平迁移 |
| 2.4 Transwell小室法检测细胞垂直迁移 |
| 2.5 Transwell小室法检测细胞侵袭 |
| 2.6 Matrigel基质胶法检测细胞管腔形成 |
| 3. 统计学方法 |
| 4. 实验结果 |
| 4.1 正常HUVEC细胞形态 |
| 4.2 CCK-8结果 |
| 4.3 划痕实验细胞水平迁移结果 |
| 4.4 Transwell小室实验细胞垂直迁移结果 |
| 4.5 Transwell小室实验细胞侵袭结果 |
| 4.6 Matrigel基质胶实验细胞管腔形成结果 |
| 5. 讨论 |
| 5.1 细胞迁移 |
| 5.2 细胞侵袭 |
| 5.3 细胞管腔形成 |
| 6. 结论 |
| 参考文献 |
| 创新性 |
| 不足与展望 |
| 综述一 脉络膜新生血管的发病机制及中西医治疗的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 姜黄素在眼科疾病的研究进展 |
| 参考文献 |
| 研究生期间学术表现 |
| 致谢 |
| 附: 查新报告 |
（2）兔角膜内皮损伤的组织工程修复（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 角膜 |
| 1.1 角膜的结构 |
| 1.2 角膜的功能 |
| 1.3 角膜的生理环境——泪液与房水 |
| 1.4 角膜的免疫赦免特性 |
| 2 角膜内皮盲 |
| 2.1 角膜内皮层 |
| 2.2 角膜内皮盲 |
| 2.3 角膜内皮盲的治疗 |
| 3 组织工程角膜内皮 |
| 3.1 组织工程简介 |
| 3.2 组织工程角膜内皮研究进展 |
| 4 壳聚糖在组织工程中的应用 |
| 4.1 壳聚糖类简介 |
| 4.2 壳聚糖类对种子细胞的促生长作用 |
| 4.3 壳聚糖类作为生物材料支架 |
| 5 研究的目的与意义 |
| 第二章 壳聚糖基水凝胶的毒性研究 |
| 第一节 壳聚糖基水凝胶对大鼠主要脏器的亚慢性毒性研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 材料与仪器 |
| 1.3 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 大鼠一般临床状况 |
| 2.2 血清生化指标 |
| 2.3 脏器系数 |
| 2.4 病理切片 |
| 3 讨论 |
| 4 本节小结 |
| 第二节 壳聚糖基水凝胶对兔角膜内皮细胞的毒性研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 材料与仪器 |
| 1.3 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 兔角膜内皮细胞的培养 |
| 2.2 细胞毒性的定性评价 |
| 2.3 细胞毒性的定量评价 |
| 3 讨论 |
| 4 本节小结 |
| 第三章 兔角膜内皮细胞培养基的优化：壳聚糖衍生物对兔角膜内皮细胞生长的影响 |
| 第一节 壳聚糖衍生物的性质测定 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料与仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 4 本节小结 |
| 第二节 壳聚糖衍生物对兔角膜内皮细胞生长的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 材料与仪器 |
| 1.3 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 单一糖对角膜内皮细胞生长的影响 |
| 2.2 混合糖对角膜内皮细胞生长的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 本节小结 |
| 第四章 兔角膜内皮损伤的组织工程修复 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 材料与仪器 |
| 1.3 实验方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 眼相观察 |
| 2.2 裂隙灯观察 |
| 2.3 扫描电镜观察 |
| 2.4 组织切片观察 |
| 3 讨论 |
| 4 本节小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 在学期间发表的学术论文与研究成果 |
（6）多糖生物膜体外构建兔角膜内皮细胞载体及移植的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 缩略语 |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 第一节 角膜内皮损伤治疗的研究进展 |
| 第二节 角膜内皮细胞体外培养的研究 |
| 第三节 甲壳素及其衍生物的生物学特性 |
| 第四节 角膜支架材料的研究进展 |
| 展望 |
| 第二章 角膜内皮细胞的体外培养研究 |
| 第一节 兔、猫、狗角膜内皮细胞的培养及研究 |
| 1. 材料及方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第二节 兔角膜内皮细胞相关指数的测定 |
| 1. 材料及方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第三节 海洋活性物质对角膜细胞生长的影响 |
| 1. 材料及方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第三章 三种多糖生物膜片细胞相容性及组织相容性的研究 |
| 1. 材料及方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第四章 兔角膜内皮细胞活性载体的培养及移植研究 |
| 1. 材料及方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 总结 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（8）内皮素-1对体外培养的肉鸡肺动脉内皮细胞的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写词汇表(Abbreviation) |
| 前言 |
| 1.肉鸡肺动脉高压综合征的研究进展 |
| 1.1 动脉高压综合征的病因 |
| 1.1.1 环境因素 |
| 1.1.2 遗传因素 |
| 1.1.3 营养因素 |
| 1.1.4 激素及其受体和自由基因素 |
| 1.1.5 肠道产氨因素 |
| 1.2 动脉高压综合征的临床症状 |
| 1.3 动脉高压综合征的病理学变化 |
| 1.4 动脉高压综合征的血液生理生化 |
| 1.5 肺动脉高压综合征模型的复制 |
| 1.5.1 高钠诱导肺动脉高压 |
| 1.5.2 甲状腺素诱导肺动脉高压 |
| 1.5.3 低温诱导肺动脉高压 |
| 1.5.4 低氧诱导肺动脉压 |
| 1.6 肺动脉高压综合征的防治措施 |
| 1.7 肺动脉高压综合征的临床预测 |
| 2.内皮素-1及其受体的研究进展 |
| 2.1 内皮素-1的合成、分布和代谢 |
| 2.2 内皮素-1的生物学作用 |
| 2.3 内皮素的调控、生物合成与释放 |
| 2.4 内皮素受体及其拮抗剂 |
| 3.内皮素-1与肺动脉高压综合征 |
| 4.其他活性物质与肺动脉高压综合征的关系 |
| 4.1 一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)与肺动脉高压综合征 |
| 4.1.1 一氧化氮生物合成和作用机理 |
| 4.1.2 一氧化氮合酶 |
| 4.1.3 一氧化氮合酶抑制剂 |
| 4.1.3 一氧化氮与肉鸡肺动脉高压综合征的关系 |
| 4.2 心钠素与肺动脉高压综合征 |
| 4.2.1 肺动脉高压时的心钠素水平情况 |
| 4.2.2 内皮素和心钠素合成与释放的相互影响 |
| 4.2.3 心钠素拮抗内皮素的生物学效应 |
| 4.2.3 内皮素拮抗心钠素的生物学效应 |
| 4.3 血管紧张素Ⅱ与肺动脉高压综合 |
| 研究目的和意义 |
| 试验研究 |
| 试验一 肺动脉内皮细胞的体外培养 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 主要仪器 |
| 1.3 主要试剂及用具 |
| 1.4 主要试剂的配制 |
| 1.5 取材 |
| 1.6 原代培养 |
| 1.7 传代培养 |
| 1.8 细胞形态的观察 |
| 1.8.1 细胞计数 |
| 1.8.2 细胞生长曲线 |
| 1.8.3 体外活体染色观察 |
| 1.8.4 倒置光学显微镜下观察 |
| 1.8.5 HE染色标本观察 |
| 1.9 内皮细胞免疫组织化学鉴定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1细胞形态观察结果 |
| 2.1.1 细胞计数 |
| 2.1.2 细胞生长曲线 |
| 2.1.3 体外活体染色观察 |
| 2.1.4 倒置光学显微镜下观察 |
| 2.1.5 HE染色标本观察 |
| 2.2 内皮细胞免疫组织化学鉴定 |
| 3 讨论 |
| 3.1 关于细胞培养方法 |
| 3.2 排除成纤维细胞 |
| 3.3 关于培养液 |
| 3.4 关于传代培养 |
| 3.4 关于培养过程中防止污染 |
| 试验二 外源性ET及其他试剂对肺动脉内皮细胞的影响 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验细胞 |
| 1.2 主要仪器 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 实验细胞的分组及处理(试验分组n=6) |
| 1.4.1 试验细胞分组 |
| 1.4.2 试验前细胞的处理 |
| 1.5 测定项目及方法 |
| 1.5.1 内皮细胞培养上清夜中一氧化氮合酶(NOS)活性的测定 |
| 1.5.2 内皮细胞培养上清液中丙二醛(MDA)含量的测定 |
| 1.5.3 内皮细胞培养上清夜中超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 |
| 1.5.4 内皮细胞培养上清液中心钠素(ANP)活性的测定 |
| 1.5.5 内皮细胞培养上清液中血管紧张素Ⅱ(AⅡ)活性的测定 |
| 1.5.6 MTT法检测肺动脉内皮细胞的增殖情况 |
| 1.6 数据处理 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 内皮细胞培养上清液中一氧化氮合酶(NOS)的含量值 |
| 2.1.1 不同剂量内皮素组的NOS动态变化 |
| 2.1.2 L-Arg,L-Arg+ET-1,L-NAME组NOS的动态变化 |
| 2.2 内皮细胞培养上清液中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量值 |
| 2.2.1 不同剂量内皮素组的MDA和SOD动态变化 |
| 2.2.2 L-Arg,L-Arg+ET-1,L-NAME组的MDA和SOD动态变化 |
| 2.3 内皮细胞培养上清液中心钠素(ANP)和血管紧张素Ⅱ(AⅡ)的含量值 |
| 2.3.1 剂量内皮素组的ANP和AⅡ动态变化 |
| 2.3.2 L-Arg,L-Arg+ET-1,L-NAME组的ANP和AⅡ动态变化 |
| 2.4 MTT法检测肺动脉内皮细胞增殖情况的结果 |
| 2.4.1 不同剂量内皮素组的增值情况 |
| 2.4.2 L-Arg,L-Arg+ET-1,L-NAME组的增值情况 |
| 3 讨论 |
| 3.1 ET-1及L-Arg,L-Arg+ET-1,L-NAME对体外培养肺动脉内皮细胞产生NOS的影响 |
| 3.2 ET-1及L-Arg,L-Arg+ET-1,L-NAME对体外培养肺动脉内皮细胞产生MDA、SOD的影响 |
| 3.3 ET-1及L-Arg,L-Arg+ET-1,L-NAME对体外培养肺动脉内皮细胞产生ANP、AⅡ的影响 |
| 3.4 ET-1及L-Arg,L-Arg+ET-1,L-NAME对体外培养肺动脉内皮细胞增值情况的影响 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
（10）内皮素在增生性玻璃体视网膜病变中作用的研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾内皮素及其在眼部的作用 |
| 前言 |
| 1 内皮素的合成分泌及转录调节 |
| 2 内皮素的信号转导 |
| 3 内皮素在眼部的生物学作用 |
| 1 内皮素在人视网膜脱离PVR中的表达 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 研究对象、仪器和试剂 |
| 1.3 研究方法 |
| 1.4 结果 |
| 1.5 讨论 |
| 2 内皮素在实验性视网膜脱离早期的短时段表达 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 研究对象、仪器和试剂 |
| 2.3 研究方法 |
| 2.4 结果 |
| 2.5 讨论 |
| 3 内皮素对RPE粘附、移行和增生的影响 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 研究对象、仪器和试剂 |
| 3.3 研究方法 |
| 3.4 结果 |
| 3.5 讨论 |
| 4.牵拉对ET表达和ET对[Ca~(2+)]i的影响以及自身调节 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 研究对象、仪器和试剂 |
| 4.3 研究方法 |
| 4.4 结果 |
| 4.5 讨论 |
| 小结 |
| 附图及说明 |
| 参考文献 |
| 前言与文献回顾部分 |
| 实验第一部分 |
| 实验第二部分 |
| 实验第三部分 |
| 实验第四部分 |
| 个人简历和研究成果 |
| 志谢 |
四、内皮素-1对培养的兔角膜内皮细胞的影响（论文参考文献）
- [1]姜黄素抑制实验性脉络膜新生血管的机制研究[D]. 陈水龄. 中国中医科学院, 2020(01)
- [2]兔角膜内皮损伤的组织工程修复[D]. 赵伟玮. 中国海洋大学, 2012(03)
- [3]氯通道阻断剂5-硝基-2-（3-苯丙胺）苯甲酸在内皮素-1对体外培养牛角膜内皮细胞增殖中的影响[J]. 胡维琨,谢二娟,张虹,李贵刚,刘荣. 新乡医学院学报, 2010(06)
- [4]氯离子通道-3反义寡核苷酸对内皮素-1促增殖体外培养的牛角膜内皮细胞的抑制作用[J]. 胡维琨,谢二娟,张虹,李贵刚,刘荣. 眼科新进展, 2010(10)
- [5]角膜内皮细胞的损伤及促进其修复的因素[J]. 张翠英,刘华. 医学综述, 2007(11)
- [6]多糖生物膜体外构建兔角膜内皮细胞载体及移植的研究[D]. 位晓娟. 中国海洋大学, 2007(03)
- [7]角膜内皮细胞体外培养促增殖因素的研究进展[J]. 郝兆芹,张林. 世界核心医学期刊文摘.眼科学分册, 2006(05)
- [8]内皮素-1对体外培养的肉鸡肺动脉内皮细胞的影响[D]. 孙扬. 华中农业大学, 2006(02)
- [9]角膜内皮细胞电生理学特性的研究进展[J]. 刘蓉,张林. 世界核心医学期刊文摘.眼科学分册, 2006(03)
- [10]内皮素在增生性玻璃体视网膜病变中作用的研究[D]. 王建洲. 第四军医大学, 2005(06)